分子生提物学7-1.pptxVIP

RNA的转录合成-真核生物的RNA转录;Multiple forms of eukaryotic RNA pol. More promoters Enhancers , silencers etc cis-elements and trans-fators ;真核基因转录的特点;真核生物的RNA聚合酶;对抑制物的敏感性;定位及产物;RNA polymerase in Eukaryotes ; RNApol II (B); ---For pre-mRNA transcription ---Located in nucleoplasm ---L’ maximum subunit 240 kd have specific COOH-end named CTD ( Carboxyl Terminal Domain ) only in RNApol II ---CTD-end; 7aa repeats high frequency phosphorylation Tyr—SerP—Pro—ThrP—SerP—Pro—SerP ;Yeast 26X Drosophila 44X repeat unit of 7 aa / in CTD Rat Human 52X ;CTD中的 Ser和 Thr可被高度磷酸化，并且可逆。 磷酸化的 RNApol Ⅱ被称为ⅡA 非磷酸化的 RNApol Ⅱ称为ⅡB CTD参与转录 → ⅡB → ⅡA → 使RNApol易于离开 启动子进入延伸过程（10倍） ;定义：RNA聚合酶和基本???录因子（bTF）的结合区域，它们共同组装成转录起始复合物。;Three eukaryotic RNA polymerases have: Different structures Transcribe different classes of genes Expect that the 3 polymerases would recognize different promoters ;Class II Promoters;Core Promoter Elements – TATA Box;Core Promoter Elements;TATA区主要作用是使转录精确起始，如果该区缺失或发生突变则导致转录起始位点不确定。 在二类启动子里，TATA box是转录起始复合体蛋白组装的位置。第一个结合在该位点的蛋白是TBP，当其结合后，会增加其他转录因子结合的几率。;Upstream Elements;;GC box可能有多个，如果发生突变或者缺失，则会对活性有很大影响，比如SV40 early gene具有6个GC box，丢失1个活性只有33%，丢2个则有13%，3个则无活性 GC box具有位置依赖性，但没有方向依赖性。如果离开TATA box 太远则不起作用。;CCAAT区和GC区主要控制转录起始频率，基本不参与起始位点的确定。CAAT区域任何碱基改变对转率起始频率和强度影响都很大。另外在TATA区和UPE区域插入核苷酸序列也会降低活性。这2个区域方向对于转录的影响不大。;Class I Promoters;RNA pol Ⅰpromoter;Class III Promoters;Promoters of Some Polymerase III Genes;基本转录因子bTF;;RNA聚合酶I的转录因子;;RNApol Ⅲ的转录因子 两种内部启动子的转录起始需要三种辅助因子 TFⅢA 一种含9个锌指结构的蛋白 TFⅢB 由TBP和BRT、B”等蛋白构成 TFⅢC 至少5个亚基以上 TFⅢB和TFⅢC是几类RNApol Ⅲ共同需要的转录因子 TFIIIA因子主要是针对5S rRNA的转录来讲常用。 TFⅢB是真正的转录起始因子，A和C仅仅是组装因子，作 用是协助TFIIIB的定位。;一般模式;The Role of TBP 三种RNApol 的转录起始均需要TBP ★ 所有 RNApolⅢ 的转录起始都需要TBP ★ 在 RNApolⅠ的转录起始过程中,TBP是SL1的 组份，起定位RNApolⅠ的作用 ★