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第5章微生个物的营养与培养基317

目前在微生物发酵工业所利用的碳源物质主要有单糖、蔗糖、淀粉、糖蜜、麸皮、米糠. 对大多数异养菌来说,其最适碳源是“C.H.O”型碳源,其中: 糖类—最广泛、最经济;酸醇脂类——次要 糖类中: 单糖双糖、多糖 己糖戊糖 葡萄糖、果糖半乳糖、甘露糖等 淀粉纤维素、几丁质等 一般不把含蛋白质、氨基酸的牛肉膏、蛋白胨等原料降格做碳源使用。 注意: “碳源谱广泛”是针对整个微生物界来说的,对某一具体微生物来说,差异很大。 对一切异养菌来说,其碳源可同时兼作能源,因此碳源是它们的双功能营养物。 对天然来源的碳源营养物(如糖蜜、淀粉质原料)来说,除主要提供碳源营养外,其中还含有氨基酸、无机盐等多种营养成分。 一般而言,能利用有机氮的也可以利用无机氮 但是,能利用无机氮的不一定能利用有机氮。 对大多数异养菌来说,其最适氮源是“N.C.H.O”型或“N.C.H.O.X”型氮源(有机氮源) “N.H”型氮源(无机氮源,如NH4+)次之。 食品与发酵工业中,异养型微生物培养基最常用的有机氮源是:铵盐、硝酸盐、尿素、氨基酸、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏及饼粕粉(黄豆饼、花生麸)、蚕蛹粉、鱼粉等。 配制培养基时,大量元素一般首选K2HPO4、MgSO4等,可同时提供4种大量元素。P一般需要0.005~0.01 mol/L, 无机合成培养基中,S的来源常来自硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锰,浓度0.001 mol/L 。 常用天然水、自来水来配制培养基以提供各种微量元素. 一些无机盐离子的功能 P,平衡代谢,提高葡萄糖的利用率。 S,合成含硫氨基酸(如胱氨酸)、辅酶的活性基(如辅酶A、谷胱甘肽)以及一些维生素(硫胺素、生物素等)。 Mg,维持某些酶的活性(如磷酸化酶)。 K、Na,酶的激活剂,促进碳水化合物代谢,维持细胞质的胶体状态及细胞渗透压。 Fe,参与细胞色素氧化酶的活性基铁卟啉的组成。 无机元素(除碳、氮源外)的来源和功能 无机元素(除碳、氮源外)的来源和功能 广义的生长因子—— 维生素、生物碱、卟啉、甾醇、短链的分支或直链脂肪酸、氨基酸等 狭义的生长因子——仅指维生素 生长因子自养型微生物:多数真菌、放线菌和细菌。 生长因子异养型微生物:乳酸菌、营养缺陷型突变株及致病菌等。 生长因子过量合成的微生物:可用其生产有关的生长因子(如维生素),如阿舒假囊酵母生产B2,谢氏丙杆菌、有些链霉菌生产B12等。 配制培养基时,常使用生长因子丰富的天然物质制备物作为补充生长因子的培养基成分。 如:酵母膏、玉米浆、麦芽汁、肝浸液等。 水分活度aw——表示天然或人为环境中微生物可实际利用的游离水的含量。 同温同压下,某溶液的蒸气压(P)与纯水蒸气压(P0)之比: 运输方向: 同向运输(symport) 逆向运输(antiport) 单向运输(uniport) 钠钾泵的主动运输 主动运输有何重要意义? 最关键的是,微生物通过主动运输可以从各种环境中吸收到营养物质,从而对提高其环境的适应性,具有重要作用。 电子传递体系中产生电子流,膜内外产生电位差,引起载体蛋白变构,推动物质从细胞外转运至细胞内。 藻类及蓝细菌等和植物一样,以水为电子供体(供氢体),进行产氧型的光合作用,合成细胞物质。 微生物的营养类型 讨论:如何利用生长谱法测知微生物对某一类营养素中各种物质的利用情况? 有把试验菌的悬浮液与不含这一类营养素但含有其它所有营养成分的固体培养基混合后,在培养皿上倒成平板,然后在平板上划分区,每一小区上放上少量欲测营养素中的一种物质。经培养后,凡在其周围出现生长圈的,证明微生物可以利用这种物质作为营养素。 Eh 指以氢电极为标准时某氧化还原系统的电极电位值。标准氢电极是一个半电池,它由pH为零的HCl溶液、涂满铂黑的铂箔电极和压力为1个大气压的氢所组成的。在这种条件下,此标准氢电极的电极电位等于零。 在溶液中的某氧化还原偶,当其氧化型和还原型的浓度相等时,所产生的氧化还原势可用E0表示。任何氧化还原系统所产生的氧化还原势明显地受pH的影响。 在生物体系中,常用E′表示pH为7时某氧化还原偶的氧化还原势。氢电极E′的上限是+0.82V,它出现在高氧且没有氧消耗的环境中,下限为-0.42V,出现在富含氢的环境中。 除测定电极电位外,培养基中的Eh值还可使用氧化还原指示剂如刃天青(resazurin)等来测定。刃天青在培养基中的加入量一般为1mg/L(1ppm)。它在无氧条件下呈无色状态,这时的Eh值相当于-40mV左右;在有氧条件下,其颜色与溶液的pH有关(中性时呈紫色,碱性时呈蓝色,酸性时呈红色;在微量氧时,它呈粉红色。刃天

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