一种pH稳定的黄色漆酶的快速纯化和性质特征-微生物学报.PDF

微生物学通报 FEB 20, 2009, 36(2): 299~308 Microbiology © 2009 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 主编点评文章 一种 pH 稳定的黄色漆酶的快速纯化和性质特征 1* 1 2 1 杨秀清 赵晓霞 赵永福 郑 媛 (1. 030006) (2. 030500) 摘 要: 通过丙酮沉淀和 DEAE- cellulose DE52 柱层析, 快速、有效地从一株白腐菌 Trametes sp. SQ01 的发酵液中纯化了漆酶。纯化的漆酶并非传统漆酶那样呈现蓝色, 而是一种黄色蛋白。以 ABTS 为底物时, 该酶的最适 pH 和温度分别是 pH 4.5 和 70°C, Km 为 0.029 mmol/L 。T. SQ01 漆酶在 pH 3.0~11.0 时, 酶活相对稳定, 在 pH 5.0 时最为稳定, 是目前报道的 pH 稳定性最好的 漆酶。低浓度的金属离子(1 mmol/L) Cu2+ 、Mg2+ 、Ca2+ 和Co2+ 对漆酶有促进作用, 而高浓度 (5 mmol/L)的Co2+ 、Zn2+ 、 Mn2+ 、Mg2+ 却抑制漆酶酶活。SDS 对该酶有激活作用, 当其浓度为1 mmol/L 时, 漆酶相对酶活达到 128%。DTT对漆酶强烈抑制, 即使是浓度为1 mmol/L, 亦可完全抑 制漆酶酶活。纯化后的漆酶对亮蓝(RBBR) (100 mg/L)的脱色能力显著, 0.5 U/mL 的漆酶在 10 min 内即可达到 80% 的脱色率。T. sp. SQ01 漆酶的快速纯化以及高效脱色的能力表明该酶在染料脱 色降解方面有着广阔的应用前景。 关键词: 漆酶, 纯化, pH 稳定性, 底物特异性, 染料脱色 A pH-stable Yellow Laccase from White Rot Fungus Trametes sp. SQ01: Rapid Purification and Characterization YANG Xiu-Qing1* ZHAO Xiao-Xia1 ZHAO Yong-Fu2 ZHENG Yuan1 (1. Institue of Biotechnology, Shan Xi University, Key Laboratory of Chemical Biology and Molecular Engineering of Ministry of Ecucation, Taiyuan, Shanxi 030006, China) (2. Jiaocheng Bureau Environmental Protection of Shanxi , Jiaocheng, Shanxi 030500, China) Abstract: The white ro