金黄色葡萄球菌生物被膜和纤维蛋白原结合能力研究-微生物学专业论文.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 』IIIIIIIIIIIIHIIIIIHIIIIIlUlIII 』IIIIIIIIIIIIHIIIIIHIIIIIlUlIII Y2589797 University of Science and Technology of China A d issertation for doctor’S deg ree Biofi lm Formation and Fibrinogen Binding Ability of Staphylo co ccus a ure us 中国科学技术大学学位论文原创性声明本人声明所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所取得的 中国科学技术大学学位论文原创性声明 本人声明所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所取得的 成果。除己特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含任何他人已经发表或 撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中作 了明确的说明。 作者签名： 签字吼尘幽 中国科学技术大学学位论文授权使用声明 作为申请学位的条件之一，学位论文著作权拥有者授权中国科学技术大学 拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权按有关规定向国家有关部门或机构 送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文编入《中 国学位论文全文数据库》等有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描 等复制手段保存、汇编学位论文。本人提交的电子文档的内容和纸质论文的内 容相一致。 保密的学位论文在解密后也遵守此规定。 占公开 口保密(——年) 作者签名： 燃 导师签 签字日期： 》cq．s一二] 签字日期：．班!肇!尘1 29 摘要摘要 摘要 摘要 金黄色葡萄球菌是一种重要的人类病原体，可引起各种疾病，从轻则局部皮 肤感染到危及生命的全身性感染。金黄色葡萄球菌NCTC8325(RNl及其衍生菌 株)被广泛用来作为一种模式菌株，于1960年从一位败血症患者身上分离获得， 在近50年来的研究后，积累了无与伦比的知识财富。本论文针对金黄色葡萄球 菌NCTC8325(I斟1及衍生菌株)的调控机制，研究分为两个方面，如下所示： 1．GbaAB影响PIA依耐型的生物被膜形成 革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌和表皮葡萄球菌能够粘附到生物材料表面，进 而形成具有抵抗性的生物被膜。确定参与金黄色葡萄球菌粘附和生物被膜形成的 生物分子和调控因子，有助于了解生物被膜相关的感染。在这研究中，我们确定 了新的操纵子，加“B(glucose induced biofilm accessory gene)，能够影响金黄色 葡萄球菌NCTC8325生物被膜的形成。实时逆转录PCR(RT-PCR)和Gel shift 分析表明，GbaA和Gb出由相同的转录本所转录，并且GbaA直接通过自抑制 来抑制加刎B操纵子的转录。我们的结果表明，与野生型相比，加“突变体增 强了生物被膜的形成。然而，曲衄和加鲥曰双突变体减弱了生物被膜的形成， 这表明gbaAB操纵子参与生物被膜形成，而加以可能是在生物被膜调节的关键 基因。表型分析表明，gbaAB操纵子介导金黄色葡萄球菌多细胞聚集阶段的生物 被膜形成，而不是初始粘附阶段的。此外，real-time RT-PCR分析表明，与野生 型进行比较，在曲“突变体中icaA被上调，而在的以和gbaAB突变体中wa．4 被下调。此外，曲刎和gbaB突变影响葡萄糖诱导的生物被膜形成。我们的研究 结果表明，gbaAB操纵子参与金黄色葡萄球菌多细胞聚集阶段的受葡萄糖诱导的 生物被膜形成，而这种调节可能是通过ica操纵子来介导的。 2．Rot和Agr系统主要通过C1m来调控与纤维蛋白原的结合能力 金黄色葡萄球菌成功地作为一种病原体，其部分是由于其粘附到广泛宿主组 织，包括宿主细胞外基质蛋白，如纤维蛋白原，纤连蛋白和胶原蛋白的能力。金 黄色葡萄球菌表达两种蛋白可以特异性结合于纤维蛋白原，聚集因子A和B (Cl缓和Clm)。毒素阻抑子(Rot)被称为是在金黄色葡萄球菌毒力基因表达 的全局调控子。Rot的翻译是由金黄色葡萄球菌附属基因调控子(Agr)群体感应 系统的调控。在这项研究中，我们证明了Rot和Agr系统能够在不同的细菌生长 阶段，影响细菌与人纤维蛋白原(Fg)的结合能力。根据我们的real—timeRT．PCR 结果，我们证实Rot和Agr系统都对c拙表达无显著作用。然而，Rot是郴激 活子，同时Agr／RNAIII的可以通过Rot来调节c口露的表达。我们的凝胶迁移数 摘要据进一步表明， 摘要 据进一步表明，Rot可能直接结合到cVB的启动子区域来调控c{7曰表达。此外， Rot和Agr系统展现出对c加转录调节作用和细菌的纤维蛋白原结合能力调节作 用是