《实验四离体心脏的影响》-课件设计（公开）.pptVIP

动物机能学实验2 实验八 药物对离体心脏的影响 编者：陈小军 【实验原理】 蛙心离体后，用理化因素类似于两栖类动物血浆的任氏液灌注时，在一定时间内，仍保持有节律的舒缩活动。 当能影响心脏活动的药物作用于心脏时，心脏的节律性舒缩活动将随之改变，此外，心脏受植物性神经的支配及某些体液因素的调节和影响，因此，在灌流液中，滴加肾上腺素、乙酰胆碱及其相应的受体阻断剂心得安和阿托品等药品，可间接观察神经体液因素对心脏活动的影响。 【实验目的】 1. 学习离体蛙心制备及灌注方法。 2. 观察药物和某些神经体液因素对心脏节律性活动的影响。 【实验材料】 （一）动物 蟾蜍 （二）器材 生物机能系统或BL-420生物信号采集系统，张力换能器，探针，外科剪，小手剪，烧杯，滴管，蛙心套管，蛙心夹，铁支架，试管夹，眼科镊，丝线，双凹夹，蛙板，蛙足钉等。 （三）药品 任氏液，0.1％毒毛旋花紫苷K ，2％的氯化钙 ，1:100,000乙酰胆碱 ，0.5%阿托品。 【实验步骤】 1. 取蟾蜍1只，使头向下，将蛙针于枕骨大孔处向前插入颅腔左右摇动，破坏脑组织，再将针插入脊椎管，以破坏脊髓，动物全身软瘫。 2. 仰位固定于蛙板上，先用普通剪刀将胸部皮肤剪开，再将胸部肌肉及软骨剪去，用虹膜剪剪破心包膜暴露心肌。 3.在右主动脉下穿一根线并结扎，再在左右主动脉下穿一根线。将心脏用玻璃分针向上翻至背面，将前后腔静脉和左右肺静脉一起结扎（注意勿扎住静脉窦）。 4.在主动脉分支处下穿一线，打好松结，备结扎套管之用。 5. 提起左主动脉远心端线，用眼科剪刀在左主动脉上靠近动脉园椎处剪一“ V ”形斜口，将盛有少量任氏液的蛙心插管由此口插入主动脉； 插至动脉园锥时略向后退，在心室收缩时，向心室后壁方向下插，经主动脉瓣插入心室腔（不可插入过深，以免心室壁堵住插管下口）。 插管若成功进入心室、管内液面会随着心室跳动而上下波动。用左主动脉上近心端的备用线结扎插管，将松结扎紧并固定在套管的小钩上，以免心脏向下滑脱。 用滴管吸去套管内血液，换上新鲜任氏液，以防止血块堵塞套管。 提起插管，在结扎线远端分别剪断左主动脉和右主动脉。轻轻提起插管，剪断左右肺静脉和前后腔静脉，将心脏离体，用滴管吸净插管内余血，加入新鲜任氏液。反复换洗数次，直至液体完全澄清。 保持灌流液面高度恒定（1~2cm），即可进行实验。 【观察与纪录】 （1）描记正常蛙心收缩曲线 曲线幅度：代表心脏收缩的强度。 曲线疏密：代表心跳频率。 曲线的规律性：代表心室的节律性。 曲线的顶点水平：代表心室收缩的程度。 曲线的基线：代表心室舒张的程度。 （2）连接实验装置： 将蛙心套管固定于铁架台，用带有长线的蛙心夹在心舒期夹住心尖部，将长线连于张力换能器（薄片近断朝上），换能器前部稍向下，以免液体流入换能器而损坏换能器。 换能器连接BL-420生物信号采集系统输入孔CH1。 【软件操作】 依次选定“实验项目”“循环实验”“蛙心灌注”，编辑标记条，作好每一步标记。 （1）记录一段正常心脏搏动曲线后，注意观察心博频率与幅度。 （2）滴入0.1％毒毛旋花紫苷K1～2滴，观察心博曲线变化，并记录结果。用任氏液冲洗三次，待频率与幅度接近正常值，再进行下一步。 （3）于灌注液内加1～2滴2％的氯化钙，观察心博曲线变化，并记录结果，冲洗。 （4）于灌注液内加1:100,000乙酰胆碱1～2滴，观察心博曲线的变化，并记录结果，冲洗。 （5）于灌注液内加0.5%阿托品1～2滴，观察心博曲线的变化，然后加入1:100,000乙酰胆碱1～2滴，观察曲线有无改变，并与步骤7比较并记录结果。 【注意事项 】 1、本实验以青蛙心脏为好。因蟾蜍皮下腺体有强心苷样物质，可降低对强心苷的敏感性。（在实验可以低钙任氏液灌注蛙心，使心脏的收缩减弱，可以提高心肌对强心甙的敏感性。） 2、在整个实验过程中应保持套管内液面高度不变，以保证心脏固定的负荷。每次加试剂不宜过多，先加1～2滴，作用不明显时可再追加。 3、在实验过程中，基线的位置、放大倍数、描记速度应始终一致。 4、本实验试剂种类较多，忌错用滴管造成污染。 5、固定换能器时，应稍向下倾斜，以免液体流入换能器而损坏换能器。 6、波形不能放到最大，否则看不到幅度增大；记频率时，平衡线放到波的正中，暂停后选定区域 【作业布置】 1．实验过程中为何要求插管内的液面高度一致？ 2．实验中所用的各种药物影响心脏的机理是什么？ * *