蛋白特异性糖基化修饰的标记影像以及利用糖链为肿瘤细胞提供免疫治疗-生物化学与分子生物学专业论文.pdf.docxVIP

⑧论文作者签名： ⑧ 论文作者签名： 指导教师签名： 论文评阅人1： 评阅人2： 评阅人3： 评阅人4： 评阅人5： 答辩委员会主席： 委员1： 委员2： 委员3： 委员4： 委员5： 答辩日期： 万方数据 一 一●一 一‘一 Labeling and Imaging of Protein-Specific 。Glycosylation and Glycans-based．．__一 Immunotherapy_______-。______________．．．．．．．．．．．．．．．．．．．，—————一 for Cancer Cells． Author’S signature： Sur dsor’S signature： External Kevlewers． ．—— Examining Committee Chairperson： Examining Committee Members： Date of oral defence： 万方数据 浙江大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 浙江大学研究生学位论文独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。除了文中特II]II以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得逝鎏太堂或其他教育机构的学位或 证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文 中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名．翩存 签字日期． 幻形年多月’明 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解逝婆态堂有权保留并向国家有关部门或机 构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权逝望盘堂 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影 印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名： 苍雪花 导师签名．趴 签字日期： 羽∥年多月 万方数据 致谢在我博士毕业论文完成之际，心中感慨万千，五年时间如流水般不知不觉己 致谢 在我博士毕业论文完成之际，心中感慨万千，五年时间如流水般不知不觉己 过去，在这期间体验了喜悦，体验了失落，改变了我对许多事情原先的思维方式， 抱着感恩的态度经历了心灵的成长。 在这里，首先我要将我最诚挚的感谢和最崇高的敬意献给我的博士导师易文 教授，易老师正直的为人，严谨的做事方式，不断探索的科研精神是我一生学习 的榜样。从2013年1月到2016年6月这三年半的时间，易老师不仅是我科研的 导师，同时也是我一部分人生成长的导师。不仅在科研上为我提供了耐心高效地 指导，使我能够在科研道路上不断地探索和进步，让我能够顺利地完成博士期间 的学习和科研，同时还给予科研以外的关于人生观价值观的一些探讨和建议。这 些都将在我以后的工作和生活中一直影响着我。虽然在和易老师平常的相处模式 上我比较随意，但是这不影响我对您的尊重和敬意，真的非常感谢你这几年的教 导! 同时我要感谢我硕士期间的导师沈炳辉教授，是您给予我机会进入到我们这 个实验室学习，您渊博的学识引导我们正确地进入课题，开展课题。在实验过程 中也得到了王英杰教授、朱成钢副教授的悉心指导，也要向两位老师表示衷心的 感谢。当然也要感谢在这里结识的一群小伙伴们，你们不仅在实验上给予我无私 的帮助，还在生活中给我添加了许多的欢乐，正是由于你们的存在，让我的实验 室生活变得丰富多彩。 V 万方数据 摘要糖基化修饰在生物体内具有极大的普遍性和重要性，糖基化修饰的蛋白占细 摘要 糖基化修饰在生物体内具有极大的普遍性和重要性，糖基化修饰的蛋白占细 胞内蛋白总量超过了70％，蛋白表面的糖链修饰与其结构、功能等均存在密切的 关系。在以前的糖生物学研究中，较多的关注于蛋白整体的糖基化水平，而对于 蛋白特异性的糖基化修饰关注的较少。目前，越来越多的研究显示，在生物学进 程中，特定蛋白上的特异性糖基化比整体水平的糖基化更具有生物学意义。然而， 如何能够直接在细胞水平标记特定蛋白的特异性糖基化修饰的技术手段还有待 不断地开发。因为这存在两大难点：1、相比于磷酸化、乙酰化等蛋白翻译后修 饰，糖基化修饰的糖链结构更加的复杂；2、糖链的低免疫原性限制了针对特定 位点糖基化修饰的高效抗体的开发。为了进一步克服这些限制，我们利用代谢标 记和邻位连接技术联合应用(METPLA)的策略来标记和影像特定蛋白的特异性 糖基化修饰。这个策略中，糖链和靶标蛋白分别被连接上两条寡核苷酸，当这两 条寡核苷酸的距离40nm时，两者之间发生滚环复制反应，最终使标记的荧光 达到在显微镜下可见的量，从而影像特定蛋白上的特异性糖基化修饰。我们利用 该策略提供了