天然产二物分离技术一.pptVIP

专题二 天然产物分离技术（一） 有效成分分离技术 色谱分离技术 共性 常用类型及原理 吸附层析法 大孔吸附树脂柱色谱 分配层析法 超临界流体色谱 离子交换层析法 凝胶层析法 亲和层析法 逆流色谱 色谱技术在研究天然有机化合物的应用 1.分离混合物： 2.精致化合物： 3.鉴定化合物： 吸附层析法 基本原理 吸附柱色谱的操作技术 影响吸附柱色谱分离效果的因素 吸附过程三要素：___、___、____ 发生溶质分子与溶剂分子以及溶质分子之间对吸附剂表面的抢夺， “相似者易于吸附” 吸附与解吸附过程贯穿整个柱色谱过程。 化合物在色谱柱上移动的距离 吸附柱色谱的操作技术 色谱柱的选择 吸附剂的选择 洗脱剂的选择 操作步骤 色谱柱的选择 玻璃柱/金属柱。 柱的直径与高度比为： 一般能装样品的……倍量的吸附剂。吸附剂用量也可适当提高至样品量的……倍。 吸附剂的选择 吸附剂的吸附原理 介绍几种常用吸附剂 氧化铝 硅胶 聚酰胺 活性碳 几种常用吸附剂 氧化铝： 亲水性，吸附能力较强，适用于分离____ 中性氧化铝适于分离： 酸性氧化铝适于： 碱性……………： 硅胶 亲水性，吸附能力氧化铝，但适用范围氧化铝，亲脂及亲水性成分都可用。 适用范围： 为避免化学吸附，酸性物质宜用__，碱性物质宜用____。 柱色谱中，二者均以____目左右为宜。 聚酰胺 分子中的酰胺基可与酚类、酸类等成分形成氢键， 主要用于分离黄酮类、蒽醌类、酚类、有机酸类、鞣质（单宁）等成分 活性碳 疏水性（非极性）吸附剂。 主要分离水溶性成分，如氨基酸、糖、苷等 洗脱剂的选择 洗脱剂，又叫…、… 组成：一般由二元/三元甚至三元以上按一定比例所组成 选择方法：先用薄层色谱/纸色谱试验；再单一溶剂/混合溶剂/梯度洗脱。 选择规律： 吸附剂为极性，被分离物质为弱极性物质，一般选用……溶剂； 若被分离物质为强极性物质，则须用……溶剂为洗脱剂； 溶剂极性……，洗脱能力……。 具体选择实例： 当用氧化铝、硅胶进行柱色谱时，常用洗脱剂洗脱能力由小到大为： 石油醚己烷苯甲苯乙醚氯仿乙酸乙酯乙酸甲酯丙酮乙醇甲醇水 聚酰胺时：常用洗脱剂为： 二甲基甲酰胺稀NaOH水液/稀氨水液丙酮95%乙醇70%乙醇50%乙醇30%乙醇水 活性碳：水10%乙醇20%30%，50%，75%，95%乙醇 操作步骤 1.装柱 色谱柱底部： 　　　　湿装法 2.加样 （1）溶液加样法：样品与吸附剂之比为：1：10~1：300 3.洗脱 洗脱时的注意点 洗脱液极性应由小到大按某一梯度逐步递增，称“梯度洗脱”，极性跳跃不可过大。常用的混合溶剂组合如下： 己烷-苯、苯-乙醚、苯-乙酸乙酯、氯仿-乙醚、氯仿-乙酸乙酯、氯仿-甲醇、丙酮-水、甲醇-水 大孔吸附树脂柱色谱 性质 类型 吸附机理 吸附特点 操作技术 应用范围 类型 按其表面性质可分为四种类型： 各类型的吸附范围： 非极性吸附树脂 极性…适于 中性… 常用的为苯乙烯型、丙烯腈型及丙烯酸酯型等 吸附和筛选原理相结合 1. 分离机制如下： （1）物理吸附作用 （2）化学吸附作用 （3）氢键吸附作用 2.筛选原理 特点 选择性__、吸附容量___、解析__、机械强度___、可____使用、流体阻力较__、交换速度___、耐污染性___ 其_____、_____和_____可按照需要选择不同的原料和合成条件而改变。 操作技术 1.树脂的预处理： 含有杂质 方法：乙醇浸泡24h→充分溶胀→湿法装柱→乙醇清洗→蒸馏水洗至澄清，备用。 洗脱溶剂用量：一般为树脂的……倍，交替洗……次，最终以水洗脱即可。 2.样品液的预处理 除去部分杂质以防污染堵塞树脂。 好处：…… 3.上柱、吸附和洗脱 基本同其他色谱 湿法装柱→乙醇在柱上流动清洗→洗净乙醇 应用范围 1.在中药化学成分提取分离纯化的应用; 如： 2.在中药制剂质量控制与分析中的应用； 3.在提取分离天然色素中的应用； 如： 分配柱色谱 原理 类型 分配柱色谱分离条件的选择 操作技术 应用 原理 K 液-液萃取平衡 固定相： 分配色谱分离条件的选择 1.支持剂(要求) 应用 1.适用于分离水溶性或极性较大的成分， 2.某些非极性化合物， 物理性质： 化学性质： 稳定性： 溶解性： 性质 吸附机理 反相分配柱色谱 正相分配柱色谱 流动相 固定相 反之 反之 类型 硅藻土 纤维素粉 微孔聚乙烯粉 * * 色谱分离技术 分子蒸馏技术 膜分离技术 柱色谱 A+B 色谱法的共同特点 Rf= 溶质移动的距离 溶剂移动的距离 基本原理 溶剂 样品 吸附剂 玻璃棉 A+B B B A A 玻璃柱/金属柱 要点 吸附原理 多孔性固体物质表面积大 表面分子受力不均匀，合力向内。