人神经菌毛素_1基因重组腺病毒的构建与鉴定_郑见宝1_耿智敏2_陈强2_王林2.pdfVIP

网络出版时间：2014-03-05 09:49 网络出版地址：/kcms/detail/61.1399.R0949.003.html 人神经菌毛素-1基因重组腺病毒的构建及鉴定 1 2 2 2 郑见宝 ，耿智敏 ，陈 强 ，王 林 （西安交通大学医学院第一附属医院：1.普通外科；2. 肝胆外科，陕西西安 710061 ） 摘要：目的 构建含有人神经菌毛素-1(NRP-1)基因和3Flag标签蛋白基因的腺病毒 载体，为研究该基因对肿瘤细胞与其周围间质细胞的相互作用的影响提供了实验基 础。方法 应用Age Ⅰ和Nhe Ⅰ限制性内切酶酶切含有人NRP-1基因的质粒，再将其 与酶切线性化的pDC315-3Flag载体片段连接，构建穿梭质粒pDC315-NRP-1-3Flag ； 应用腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1 ，3Cre与此穿梭质粒共转染HEK293细胞，产生重