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吉林医药学院本科生毕业论文
PAGE
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目录
摘要……………………………………………………………… 1
一、前言 …………………………………………………………… 3
二、实验部分……………………………………………………… 3
1、材料与试剂与仪器…………………………………………………… 3
1.1材料与试剂……………………………………………………… 3
1.2仪器……………………………………………… 3
2、实验方法……………………………………………………… 4
2.1中性糖含量测定方法……………………………………… 4
2.1.1酚硫酸法测定中性糖……………………………………… 4
2.1.1.1方法
2.1.1.2方法学考察
2.1.2硫酸蒽酮法测定中性糖…………………………………… 4
2.2酸性糖含量测定方法…………………………………… 4
2.2.1硫酸咔唑法测定酸性糖………………………………… 5
2.2.1.1方法
2.2.1.2方法学考察
2.2.2间羟联苯法测定酸性糖……………………………………… 5
3、实验结果 ……………………………………………………… 6
4、小结与讨论 …………………………………………………… 13
5、参考文献………………………………………………………… 14
6、致谢……………………………………………………………… 16
摘要
目的 通过酚硫酸法和硫酸蒽酮法比较研究确定树舌多糖中中性糖含量及两种方法的比较研究; 通过硫酸咔唑法和间羟联苯法比较研究树舌多糖中中性糖含量及两种方法的比较研究。 结论: 在测定中性糖含量时,酚硫酸法和硫酸蒽酮法结果基本一致;在测定酸性糖含量时,硫酸咔唑法和间羟联苯法结果相差较大。
关键词:树舌 多糖 分离
前言
二、实验部分
1、材料与试剂与仪器
1.1材料与试剂
树舌:本品为灵芝科植物树舌灵芝 Ganoderma applanatum (Pers. ex Gray) Pat. 的干燥子实体。主要产地:全国各地均产。
本品应符合中华人民共和国卫生部药品标准中药材第一册树舌项下各有关规定。
葡萄糖 (供含量测定用,批号:10077-0101)中国药品生物制品检定所
葡萄糖醛酸 (供含量测定用,批号:10077-0102)中国药品生物制品检定所
苯酚 批号:911102
硫酸 (优级纯) 批号蒽酮 批
咔唑 批号:
间羟联苯 批号:A0265167
四硼酸钠 批号:940505
无水乙醇 批号:121202
1.2 仪器
722型分光光度计
UV-1801型紫外光谱仪, 北京瑞利公司;
BP211D型电子天平, Sartorius ;
数显恒温电浴锅, 常州中捷试验仪器制作有限公司
水为重蒸馏水, 0.45微米微孔滤膜滤过。
其他所用试剂均为分析纯。
2、实验方法
2.1中性糖含量测定方法
2.1.1酚硫酸法测定中性糖
对照品溶液的制备 精密称取葡萄糖对照品10mg,制成每1ml含1mg的溶液,作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密称取树舌总多糖50mg,置50ml量瓶中,加蒸馏水溶解,稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液10、20、30、40、50μl,置10ml具塞试管中,分别加蒸馏水至50μl,再加5%苯酚溶液1ml,浓硫酸5ml,混匀,放置20分钟,以相应的试剂为空白,照分光光度法(中国药典2010年版一部,附录V A),在487 nm波长处测定吸收度,以吸收度为纵坐标,浓度为横坐标绘制标准曲线。
测定法 精密吸取供试品溶液50μl于10ml具塞试管中,分别加入5%苯酚溶液1ml,浓硫酸5ml,混匀,放置20分钟,测定吸收度,从标准曲线上读出供试品溶液中的葡萄糖的重量,计算,即得。
2.1.1.1方法学考察
【含量测定】
本品主要有效成分是多糖类化合物,因此以葡萄糖及葡萄糖醛酸为对照品,分别测定中性糖及酸性糖的含量,作为质量控制的指标。
中性糖
(1)仪器与试药:722型分光光度计,UV-1801紫外可见分光光度计。葡萄糖(供含量测定用,批号:10077-0101),中国药品生物制品检定所
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