乙醇对四小鼠睾丸组织的氧没化应激损伤及其对生精细胞中bcl-2bax表达的影响.docxVIP

天津医科大学硕士学位论文中文捅要 天津医科大学硕士学位论文 中文捅要 目的：通过建立乙醇摄入雄性小鼠模型，观察小鼠睾丸组织氧化应激及生精 细胞Bcl．2／Bax的表达水平，初步探讨乙醇摄入对小鼠睾丸组织的氧化应激损伤 及其与生精细胞凋亡的关系及酒精导致小鼠睾丸组织损伤的可能机制。 方法：2月龄健康雄性昆明小白鼠(SPF级)48只，随机分为对照组(A组)、 低浓度酒精组(B组)、 高浓度酒精组(c组)、 高浓度酒精+ⅥtE(D组)，每组12 只，每日灌胃一次，每周测量一次体重，记录小鼠的一般状态。42天(3个生精 周期)后处死，睾丸称重后，右侧睾丸制备成组织匀浆，通过分光光度计检测抗 氧化指标SOD和氧化指标MDA水平的变化；左侧睾丸常规切片，HE染色观察 大体结构，免疫组化(S．P法)检测Bcl．2／Bax在生精细胞中的表达情况，结果采用 IHS评分，0-1分为(一)，2--3分为弱阳性(+)，4～6分为中等阳性(++)，6分 为强阳性(卅)。利用SPSSl7．0软件进行统计分析，以P0．05为有统计学意义。 结果： 1)一般指标：实验期间对照组小鼠食欲J下常，精神状态好，各酒精灌胃组小 鼠出现醉酒现象，随酒精剂量增加，醉酒现象表现愈明显。试验结束时，各组 小鼠体重均有增长，对照组(A组)小鼠平均体重增加最多，高浓度白酒组(C组) 平均体重增加最少；各组间小鼠体重增长有明显差异(Po．01)，随酒精浓度的增 加，小鼠体重增加逐渐减少。加用VitE组(D组)体重增长大于高浓度组(C组)。 各组小鼠睾丸重量系数无明显差别。 2)氧化应激的变化：与对照组相比，低浓度酒精组(B组)MDA含量增多 (PO．05)，SOD活性升高(PO．05)；高浓度酒精组(c组)MDA含量明显增多 (PO．01)，SOD活性明显降低(PO．01)，且随酒精摄入浓度的增高，MDA水平不 断增高。与对照组相比，高浓度酒精+ⅥtE组(D组)MDA含量增多(PO．05)， SOD活性降低(PO．05)；但与C组相比，其MDA含量降低(PO．05)，SOD活 性升高(P0．05)。 3)组织学的变化：常规切片HE染色显示，对照组睾丸组织生精上皮内生精 细胞排列有序，形态正常；而酒精摄入组生精上皮内生精细胞排列紊乱，可见 部分生精细胞脱落，生精细胞和精子数量减少，并可见较多的多核巨细胞。随 着酒精浓度的增加，生精上皮的厚度有减小的趋势。高浓度酒精摄入+Ⅵt E组(D 组)在生精上皮厚度、生精细胞数量及形态结构等方面，较同剂量的酒精组(C组) 天津医科大学硕十学位论文 天津医科大学硕十学位论文 为轻。 4)Bel．2／Bax的表达：免疫组化结果显示Bcl．2／Bax在各组睾丸组织中均有表 达。与对照组相比，各酒精摄入组Bel．2的表达下调，且随着酒精剂量的增加， 其表达降低；Bax的表达上调，随着酒精剂量的增加，其表达增强，差异均有统 计学意义(PO．05)。与高浓度酒精组(C组)相比，高浓度酒精+VitE组(D组)Bcl一2 的表达增加，Bax的表达降低(PO．05)；但其Bcl．2表达仍较对照组降低，Bax 表达较对照组升高(Po．05)。酒精摄入组小鼠睾丸组织MDA含量与Bax表达呈 显著正相关(r=O．938，P0．01)、与Bcl．2表达呈显著负相关(F．0．899，P0．01)。 结论： 1)过量饮酒可致成年小鼠睾丸组织发生氧化应激反应，这可能是睾丸组织损 伤和生精细胞凋亡的原因之一。VitE可以降低酒精摄入小鼠睾丸组织的氧化应 激损伤。 2)饮酒导致小鼠睾丸组织13c1．2表达水平下降，Bax的表达水平升高，推测 酒精摄入造成小鼠睾丸组织氧化应激损伤，通过Bcl．2／Bax表达的变化调控线粒 体介导的细胞凋亡通路，引起生精细胞凋亡，造成睾丸组织损伤。 关键词：乙醇生精细胞氧化应激超氧化物歧化酶丙二醛 B淋巴细胞瘤／白血病一2蛋白Bcl一2相关X蛋白 II 天津医科大学硕士学位论文Abstract 天津医科大学硕士学位论文 Abstract Objective：To observe the level of Intratesticular Oxidative stress and the expression of Bcl一2／Bax in spermatogenic cells of drinking mice，to explore the relation between Oxidative stress and apoptosis of spermatogenic cells of drinking mice． Methods：48 male mice(2 months old)were divided randomly into four gr