第八章真核生物基快因表达调控.pptVIP

DNA的甲基化发生在特定位点上。动物细胞DNA的胞嘧啶2％－7％发生甲基化。大多数甲基化基因发生于CG联体。 甲基化基因没有激活，而未甲基化基因有表达活性。因此有活性基因称为甲基化不足（undermethylation)基因。 甲基化是一个可逆的过程，去除甲基或添加甲基，可以特异性地重置基因的甲基化状态。甲基化模式的改变发生在胚胎发生时期。目前只确定了一种甲基酶可以将甲基添加到CpG对上。 适当的靶基因甲基化可以防止它们的不适当表达。 染色质重组装是指染色质或核小体的结构、成分变化，这些变化具有转录调控作用。在染色质重组装过程中，连接组蛋白H1成分的时序变化以及核心组蛋白的乙酰化，都对早期发育过程的转录调控起了关键性的作用。染色质重组装控制着早期转录抑制状态向激活状态的转变，是母型基因控制向合子型基因控制过渡（即所谓“中期囊胚转换(midblastula transition, MBT）的重要途径。 III 真核生物转录后加工的调控 1 mRNA前体的可变剪接 mRNA前体通过不同方式的剪接，可由一个基因的转录产物产生出不同的成熟mRNA，从而翻译出不同的蛋白质的过程称为可变剪接（alternative splicing）或选择性剪接，这一组相似的蛋白称为同工型蛋白质（isoform） 。 可变剪接可因mRNA前体的外显子或内含子DNA序列中发生突变、缺失，影响5’或3’剪接点的数目和位置。 与mRNA前体中内含子剪接点结合的各种snRNP中，snRNA或蛋白质的异常会造成剪接效率的大大降低。 有些基因常不止一个转录起始位点，在不同的组织或不同的发育阶段由同一个基因转录出不同的mRNA前体，以不同的剪接方式产生有活性的蛋白质。 2 反式剪接 剪接过程一般发生同一个RNA分子的内部，即通过剪接将一个RNA分子内的内含子剪掉，使外显子连接在一起，这种剪接方式称为顺式剪接（cis-splicing）。 两种不同来源的RNA前体分子的内含子之间具有互补序列时，也可以发生反式剪接（trans-splicing）。 另一种形式的反式剪接是在成熟的mRNA非翻译部分5’端剪接上一段称为“剪接前导序列”或小外显子的RNA片段。 3 RNA编辑 RNA编辑（RNA editing）是在RNA分子上出现的一种修饰现象。主要指mRNA在转录后因插入、缺失或核苷酸的替换，改变了DNA模板来源的遗传信息，从而翻译出氨基酸序列不同的多种蛋白质。 RNA编辑似乎是中心法则的例外。编辑扩大了遗传信息，也可能是生物适应的一种保护措施。 核苷酸的替换 1．Ｃ→U替换 最典型的例子是载脂蛋白B的RNA编辑。Ｃ→U替换使Apo-B 100 CAA编码的谷氨酰胺突变为UAA的终止密码子，产生编码Apo-B48的mRNA。在蛋白质水平上只保留了Apo-B100分子N端脂蛋白装配结构域，缺少了C端低密度脂蛋白受体结合区。 2．A→I替换 在β珠蛋白、c-Myc、成纤维细胞生长因子基因中都有因A→I替换使互补链的U被RNA酶A水解的现象。 可读框的改变 可读框的改变主要是核苷酸的插入或缺失。 G或C的插入则往往是因为模板上连续几个C（或G）之后，互补链因一种滑动力而被添加到RNA中。 向导RNA 向导RNA（gRNA）是一种线粒体内转录的短RNA（约55～70核苷酸），能以正常碱基配对或GU配对的方式，选择其5’末端“锚区”在mRNA上的互补序列，为随后插入或缺失U提供模板。 4 mRNA稳定性的调控 真核生物mRNA的稳定性除了取决于分子内本身的结构特征外，还受转录后修饰和与蛋白质所形成的mRNP中蛋白质的种类的影响。 真核生物细胞中，持家基因的mRNA的寿命比较长，因为这些基因的产物是细胞生命活动所必需的。 高等真核生物高度分化的细胞中，许多mRNA极其稳定。 mRNA寿命的延长增加了细胞内某种mRNA的有效浓度，提高了蛋白质合成的速度，这种翻译水平的调控方式称为翻译扩增（translational amplification）。 IV 真核生物翻译水平的调控 原核生物mRNA的半衰期很短，在翻译水平上的调控对于基因表达的影响也很小。mRNA的二级结构控制着翻译的起始，核糖体蛋白的自体控制对蛋白质的合成起抑制作用。 真核生物mRNA的半衰期比原核生物长的多，因此翻译过程受调控的机会也较多。 翻译水平的调控是真核生物基因表达多级调控的重要环节之一。真核生物翻译水平调控最普遍的机制是起始因子的磷酸化。 蛋白质合成装置各元件装配活力的改变是导致蛋白质翻译速率变化的主要因素。翻译的速度和细胞生长的速度是密切协调的。 翻译因子磷酸化调控 蛋白质合成因子的磷酸化状态与其对蛋白质生物合成的激活或抑制作用密切相关。 1．eIF-4F通过亚单位的可逆磷酸化对蛋白质