生物化学蛋白质(5).pptVIP

蛋白质一级结构的测定 2.蛋白质一级结构测定的  一般步骤： 肽链的末端氨基酸残基测定：数目 二硫键的断裂 肽链的拆分 多肽链的部分断裂和肽段的分离 酶裂解法(蛋白酶) 化学裂解法 BrCN 氨基酸组成测定和多套肽段间的 核对拼接 蛋白质分类 按化学组成分类 按分子形状分类 按结构特点分类 按功能分类 * * * 水形成了有规则的晶体点阵，产生了很强的内聚力。 冰 正在融化的冰 液态水 沸水 第一节 蛋白质的元素组成  第二节 蛋白质的构件单元  —— 氨基酸  第三节 肽 第四节 蛋白质的分子结构 第五节 蛋白质结构与功能的关系  第六节 蛋白质的重要性质 第七节 蛋白质的分离提纯  第八节 蛋白质的分类 第二章 蛋白质 2、有人认为，蛋白质的构象是蛋白质分子中的原子绕单键旋转而产生的各原子的空间排布。因此，构象并不是一种可以分离的单一立体结构形式。对此论述，你的观点如何？ 讨论型作业 ： ? 学习本章七八节并预习核酸一章的一二节 1、一段多聚赖氨酸肽段随环境pH变化其可能的折叠构象会有变化吗？为什么？如果有，变化特点怎样？ 赖氨酸 环境pH﹤9： 其侧链氨基质子化 环境pH﹥10： 其侧链氨基去质子化 a-C 原子为肽平面间的连接点 ↗ ↗ ↗ ↗ ↗ 则polyLys： 环境pH﹤9：无规卷曲 环境pH﹥10：?-螺旋 第一节 蛋白质的元素组成  第二节 蛋白质的构件单元  —— 氨基酸  第三节 肽 第四节 蛋白质的分子结构 第五节 蛋白质结构与功能的关系  第六节 蛋白质的重要性质 第七节 蛋白质的分离提纯  第八节 蛋白质的分类 第二章 蛋白质 第七节  蛋白质的分离提纯及应用 一、蛋白质分离提纯  的基本思路 二、分离纯化技术  的基本原理 三、纯度鉴定、分子量的测定及结构分析 （自学为主） 一. 蛋白质分离提纯  的基本思路 目标蛋白/有效成分 检测方法的建立-选材-前处理/抽提-粗分级-精/细分级-鉴定/(结晶)-保存 低温、操作力度的把握 检测方法的建立： 含量测定： 活性测定： 差异入手：以最少的步骤完成纯化。（如何才能做到？） 粗分级：大量差异大的杂质的去除。 精细分级：性质差异细小的杂质的去除。 粗分级 - 精/细分级： 第七节  蛋白质的分离提纯及应用 一、蛋白质分离提纯  的基本思路 二、分离纯化技术  的基本原理（发明思路？） 三、纯度鉴定、分子量的测定及结构分析 ☆蛋白质的结构解析 空间结构：X-射线衍射； 圆二色谱、核磁共振、电镜三维重建等技术  一级结构：氨基酸测序 ★ 蛋白质的一级结构： 蛋白质多肽链中氨基酸的组成及排列顺序。 酰胺主干链 另：共价结构...... 1.待测蛋白质样品的要求：均一性、 纯度、分子量 2.蛋白质测序的一般步骤 如何入手？ 二硫键的定位 ？ 转录及翻译后的加工修饰...... 第七节  蛋白质的分离提纯及应用 一、蛋白质分离提纯  的基本思路 二、分离纯化技术