SPE-HPLC联用测定饲料中5种NMCs类农药残留-仪器谱.PDFVIP

SPE-HPLC 联用测定饲料中5 种NMCs 类农药残留 北京莱伯泰科仪器有限公司 前言：N- 甲基NMCs( 以下简称NMCs) 为农业上的一类常用农药, 杀虫活性高， 残存期较短，己广泛用于水稻、水果及蔬菜等作物病虫害的防治。因其使用量及 品种的增加，造成多种农药的残留。而目前国内现有的单一品种的分析方法已不 能满足检测的需要。因此很有必要建立多种残留的分析方法。关于此类农药的多 残留分析方法，国外已有报道，主要是液相和气相色谱法，通常包括溶剂提取、 凝结、柱色谱净化、母体化合物的衍生化及色谱分折等步骤。其步骤繁多，费时 耗力。 由于NMCs 的不稳定性, 易高温分解, 故高效液相色谱(HPLC) 成为检测 NMCs 的主要和常用的方法。国外的报道绝大多数都是采用HPLC- 柱后衍生荧 光检测 , 而采用紫外检测(UV) 的报道较少。本文使用Horizon公司生产的自动 固相萃取仪，SPE- UV -HPLC联用使饲料中NMCs检测简洁化，操作简便，并且 有较理想的结果。 1、实验部分 1.1 仪器与试剂 仪器：四元低压 LabTech-HPLC ；色谱柱：LabTech C18 4.6 mm×25 cm ； LabTech 旋转蒸发仪；Horizon-Smart Prep Extractor 自动固相萃取仪；ET-6 氮吹 仪。 试剂：丙酮；石油醚；乙酸乙酯。二氯甲烷。二氯甲烷+石油醚溶液：量取500 mL二氯甲烷加500 mL；无水硫酸钠。20 g /L硫酸钠溶液:称取20 g无水硫酸钠溶 于1 L水中。洗脱液:吸取60 mL乙酸乙酯+40 mL石油醚混合。 NMCs 标准溶液配制：将5种NMCs 分别以甲醇配成一定浓度的储备液, 冰箱 保存。使用前取标准储备液一定量, 用甲醇稀释配成混合标准应用液。NMCs混 标（20 μg/mL ）：涕灭威、速灭威、克百威、甲萘威 （2 μg/mL）、异丙威。 固相萃取柱：氟罗里硅土固相萃取柱，500 mg，6 mL。 1.2 样品处理 1.2.1 样品制备 饲料，打碎。 1.2.2 样品提取 准确称取样品10g 士0.1 g ，放人三角瓶内，加100m l丙酮，于超声波提取器 内，超声提取20 min ，每隔5 min摇动一次，然后转移到100 ml离心管内，3 000 r/min 离心5 min，取清液50 mL，加到分液漏斗内，加100 mL硫酸钠溶液，依次加50 mL， 30 mL，30 ml一二氯甲烷+石油醚用分液漏斗提取、合并二氯甲烷石油醚提取液 经20 g无水硫酸钠脱水，收集在旋转浓缩器内，于60℃水浴上，减压浓缩到约2 ml ， 待柱净化。 1.2.3 样品SPE 净化 氟罗里硅土固相萃取柱使用前用20 mL洗脱液预淋洗，弃去流出液。将制备 的样品提取液倾入柱中，再用5 mL 洗脱液润洗浓缩瓶并倾入柱中。用20 mL 洗 脱液进行洗脱。收集全部洗脱液于100 mL 浓缩瓶中，于40 ℃ 水浴中浓缩至近 干。用甲醇溶解并定容至2.0 mL，过滤膜，供液相色谱测定和确证。 1.3 HPLC 色谱条件 流动相：甲醇:水(1:1) ；流速：1.0 mL/min ；紫外检测波长为210 nm ；进样量： 20 μL ；柱温：40℃。 2 结果与讨论 2.1 NMCs 的HPLC 色谱图 将5 种NMCs 混标进HPLC 分析，浓度分别是涕灭威(5.0 mg/mL)、速灭威(5.0 mg/ mL) 、克百威(5.0 mg/ mL)、甲萘威（0.5 mg/ mL ）、异丙威(5.0 mg/ mL)，结 果如图所示：见图1。 图1 5 种NMCs 的HPLC 色谱图 2.2 重复性计算 将5 种NMCs 混标进HPLC 分析，浓度分别是涕灭威(5.0 mg/mL