甘蓝柱头蛋白质双向电泳体系的建立.PDFVIP

中国蔬菜 2012（12）：30-36 CHINA VEGETABLES 甘蓝柱头蛋白质双向电泳体系的建立 1 1 1* 2* 2 2 曾 静 陈 松 朱利泉 高启国 王小佳 杨晓红  1 2 （西南大学农学与生物技术学院，西南大学植物生理生物化学实验室，重庆 400716； 西南大学 园艺园林学院，南方山地园艺学教育部重点实验室，重庆 400715） 摘 要：蛋白质提取方法和电泳条件是蛋白质组学研究中双向电泳的关键。为建立适合甘蓝柱头总蛋 白质的双向电泳体系，本试验以甘蓝柱头为材料，采用改良 TCA/丙酮沉淀法提取柱头总蛋白质，通过对 IPG 胶条、上样量、聚焦程序、SDS胶浓度等的优化，建立了甘蓝柱头总蛋白质双向电泳体系，即选用 长 17 cm、pH 3～10 NL 的 IPG 胶条，上样量 150 μg，按照聚焦程序Ⅰ进行等电聚焦，第二向 SDS 胶浓度选用 12%，得到了分辨率高、重复性好的双向电泳图片。 关键词：甘蓝柱头；自交不亲和；蛋白质双向电泳 中图分类号：S635.1 文献标识码：A 文章编号： 1000-6346（2012）12-0030-07 Establishment of Two-dimensional Electrophoresis System of Brassica oleracea L. var. capitata L. Stigma Protein 1 1 1* 2* 2 2 ZENG Jing ，CHEN Song ，ZHU Li-quan ，GAO Qi-guo ，WANG Xiao-jia ，YANG Xiao-hong 1 （College of Agronomy and Biotechnology ，Southwest University ，Plant Physiology and Biochemistry Laboratory ， 2 Southwest University ，Chongqing 4 716 ，China； College of Horticulture and Landscape Architecture，Southwest University，Key Laboratory of Horticulture Science for Southern Mountainous Regions ，Ministry of Education ， Chongqing 4 715 ，China ） Abstract ：A two-dimensional electrophoresis（2-DE）has been widely applied in proteomics research．The purpose of this study was to establish a suitable 2-DE system for proteomic analysis of Brassica oleracea L. var. capitata L. stigma．The stigmas being harvested one day before flowering was used in the experiment．We optimized th