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细胞实验室介绍.pptx

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;细胞实验室组成 细胞实验室的设置 细胞实验室的基本设备配置 常用器皿、器械 实验室操作注意事项 ; 细胞培养实验室的设计是由工作的目的和规模决定的, 其基本要求是:便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察。 细胞培养实验室的设置必须满足三个基本的需要,即:实验准备(培养基配制,洗涤与灭菌等)、无菌操作、控制培养。 ;基本组成:; 消毒准备室 制备室 无菌操作室 ;消毒准备室 功能 一切与实验有关的准备工作 要求 设备的安装和排列要合理 房间要宽敞明亮,通风条件好 地面要便于清洁、防滑 配备 实验台,高压灭菌锅、排风灭火设备、 超声波清洗器、洗瓶机等。;制备室 功能 进行培养液及相关试剂的配制 要求 在无菌操作台内过滤、除菌。 配备 冰箱、天平、真空泵、PH计等。; 无菌操作室 地面、天花板及四壁尽可能光洁,无死角,易于清洁。 大小适度,层高不高于2.5米。 干爽、安静、清洁、明亮。 紫外灯1-2盏,保持室内无菌状态。;无菌操作室 设置空气过滤和恒温恒湿装置,恒温温度26度左右。相对湿度控制在30-65%。 保持正压,尽量减少与外界的空气对流,减少尘埃与微生物侵入。 通常由内外间组成,外间为缓冲间,用于准备工作。 研究人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。 ;无菌操作;显示pH的观察。 无菌操作间的空气消毒: 紫外线灯—-产生臭氧,并且室内温度及湿度均较高,不利于工作人员健康。 空气过滤的恒温恒湿装置—-最好 无臭氧紫外线消毒器 电子消毒灭菌器—-在高压电场作用下,电子管的内外电极发生强烈电子轰击,使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂,能同细菌的胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应,从而靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌之目的,消毒时没有死角。消毒后空间的残留臭氧只需30~40min即能自行还原成氧气,空气不留异味,消毒物体表面不留残毒。 ;细胞培养实验室应能进行五方面的工作: 无菌操作 制备 清洗 消毒灭菌处理 储藏 ;三.细胞实验室???基本设备配置;冰箱 天平 酸度计 恒温水浴锅 磁力搅拌器 液氮罐 纯水设备;PH 7.0~7.4 去离子水 无菌 ;高温电子灭菌炉 蒸汽式压力灭菌锅 过滤灭菌装置 喷雾消毒器 紫外灯 ; 0.45 μm 0.22 μm; 生物安全柜;生物安全柜 根据主要几项生物安全柜国际标准的规定,安全柜可分为一级、二级和三级三大类以满足不同生物研究和防疫的要求。安全柜的分类级别与生物安全登记无关。;一级生物安全柜 保护工作人员和环境,而不保护样品。 排气口安装有HEPA过滤器。 无自带风机,依赖外接通风管中的风机带 动气流。;二级生物安全柜 可提供对样品,环境,工作人员的保护。 排气口安装有HEPA过滤器,独有特征是具有垂直层状薄片(无定向的)HEPA过滤器。 内置风机,形成下沉气流 无自带风机,依赖外接通风管中的风机带 动气流。;三级生物安全柜 为3-4级实验室生物安全等级而设计,柜体完全气闭。 通过手套进行操作,俗称“手套箱”。 实验品通过双门的传递箱进出。 适用于高风险的生物实验。; CO2培养箱 离心机 ;温度:37℃±0.5℃ CO2浓度:5% 相对湿度:100% 定期清洗、消毒 ;;5.细胞学鉴定设备;四.常用器皿、器械;移液器 电动移液器 微量移液器 多通道微量移液器;特殊用具 细胞筛网、细胞刮刀、细胞计数板;五.实验室操作注意事项;冰箱内的培养液要注明姓名、配制日期,不随便使用他人的培养液,以免交叉污染 注意各类设备运行状态,发现问题及时报告 实验完毕,及时清洁工作台面,将使用过的实验用品移出无菌室 定期对无菌室进行消毒灭菌;谢谢

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