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;细胞实验室组成
细胞实验室的设置
细胞实验室的基本设备配置
常用器皿、器械
实验室操作注意事项
; 细胞培养实验室的设计是由工作的目的和规模决定的, 其基本要求是:便于隔离、便于操作、便于灭菌、便于观察。
细胞培养实验室的设置必须满足三个基本的需要,即:实验准备(培养基配制,洗涤与灭菌等)、无菌操作、控制培养。
;基本组成:;
消毒准备室
制备室
无菌操作室
;消毒准备室
功能 一切与实验有关的准备工作
要求 设备的安装和排列要合理
房间要宽敞明亮,通风条件好
地面要便于清洁、防滑
配备 实验台,高压灭菌锅、排风灭火设备、
超声波清洗器、洗瓶机等。;制备室
功能 进行培养液及相关试剂的配制
要求 在无菌操作台内过滤、除菌。
配备 冰箱、天平、真空泵、PH计等。;
无菌操作室
地面、天花板及四壁尽可能光洁,无死角,易于清洁。
大小适度,层高不高于2.5米。
干爽、安静、清洁、明亮。
紫外灯1-2盏,保持室内无菌状态。;无菌操作室
设置空气过滤和恒温恒湿装置,恒温温度26度左右。相对湿度控制在30-65%。
保持正压,尽量减少与外界的空气对流,减少尘埃与微生物侵入。
通常由内外间组成,外间为缓冲间,用于准备工作。
研究人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。
;无菌操作;显示pH的观察。
无菌操作间的空气消毒:
紫外线灯—-产生臭氧,并且室内温度及湿度均较高,不利于工作人员健康。
空气过滤的恒温恒湿装置—-最好
无臭氧紫外线消毒器
电子消毒灭菌器—-在高压电场作用下,电子管的内外电极发生强烈电子轰击,使空气电离而将空气中的氧转换成臭氧。臭氧是一种强氧化剂,能同细菌的胞膜及酶蛋白氢硫基进行氧化分解反应,从而靠臭氧气体弥漫性扩散达到杀菌之目的,消毒时没有死角。消毒后空间的残留臭氧只需30~40min即能自行还原成氧气,空气不留异味,消毒物体表面不留残毒。
;细胞培养实验室应能进行五方面的工作:
无菌操作
制备
清洗
消毒灭菌处理
储藏
;三.细胞实验室???基本设备配置;冰箱
天平
酸度计
恒温水浴锅
磁力搅拌器
液氮罐
纯水设备;PH 7.0~7.4去离子水无菌;高温电子灭菌炉
蒸汽式压力灭菌锅
过滤灭菌装置
喷雾消毒器
紫外灯
; 0.45 μm0.22 μm;
生物安全柜;生物安全柜
根据主要几项生物安全柜国际标准的规定,安全柜可分为一级、二级和三级三大类以满足不同生物研究和防疫的要求。安全柜的分类级别与生物安全登记无关。;一级生物安全柜
保护工作人员和环境,而不保护样品。
排气口安装有HEPA过滤器。
无自带风机,依赖外接通风管中的风机带
动气流。;二级生物安全柜
可提供对样品,环境,工作人员的保护。
排气口安装有HEPA过滤器,独有特征是具有垂直层状薄片(无定向的)HEPA过滤器。
内置风机,形成下沉气流
无自带风机,依赖外接通风管中的风机带
动气流。;三级生物安全柜
为3-4级实验室生物安全等级而设计,柜体完全气闭。
通过手套进行操作,俗称“手套箱”。
实验品通过双门的传递箱进出。
适用于高风险的生物实验。;
CO2培养箱
离心机
;温度:37℃±0.5℃CO2浓度:5%相对湿度:100%定期清洗、消毒;;5.细胞学鉴定设备;四.常用器皿、器械;移液器
电动移液器
微量移液器
多通道微量移液器;特殊用具
细胞筛网、细胞刮刀、细胞计数板;五.实验室操作注意事项;冰箱内的培养液要注明姓名、配制日期,不随便使用他人的培养液,以免交叉污染
注意各类设备运行状态,发现问题及时报告
实验完毕,及时清洁工作台面,将使用过的实验用品移出无菌室
定期对无菌室进行消毒灭菌;谢谢
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