hedgehog信号通路通过erk通路介导肝细胞癌的侵袭和转移.pptVIP

* * * 目的：探讨刺猬因子（HH）信号通路在人肝癌细胞（HCC）侵袭和转移的作用 目的 1.肝细胞癌（HCC）是最常见的原发性肿瘤，具有多方面的分子发病机制。肝癌成为第五个最常见的恶性肿瘤，癌症相关死亡的第三大原因，最重要的是，肝癌的发病率正在增加 2.侵袭和转移是肝癌的两个基本特性，确定肝癌患者的预后 3.许多信号转导途径被认为参与肝癌的侵袭和发展，包括MAPK途径，PI3K/ AKT /mTOR通路，Wnt /β-catenin通路，HGF / c-Met通路，Hh信号通路 越来越多的证据表明，HH信号途径 在多种类型的肿瘤中起着重要的作用，例如，基底细胞癌，胰腺癌，结肠癌，胃癌癌，小细胞肺癌，前列腺癌，乳腺癌，早期儿童肝母细胞瘤，食管癌。 HH信号通路在人肝癌异常激活，该途径被认为参与HCC的发展。此外，HH信号通路的激活与HCC的侵袭和转移密切相关 。HH信号通路的活化标志物，Gli1在HCC肿瘤组织中明显上调，Gli受抑制也抑制肝癌肿瘤在体内和体外的生长和转移 HH信号通路影响MAPK / ERK的磷酸化导致癌变 MMP-9在各种人类癌症中主要是与肿瘤的迁移，侵袭和转移相关 SMO和MMP-9在肝癌组织中的过表达与肿瘤侵袭转移相关 我们研究Hh信号通路在肝癌侵袭和转移的的机制，特别是集中研究Hh信号通路之间的以及和MAPK信号通路的相互关系 患者和标本:86例 HCC患者 试剂 细胞培养 免疫组织化学染色 Boyden小室侵袭实验 伤口愈合实验 Western blots 分析 统计分析 材料和方法 对86例肝癌组织和肝癌细胞系BEL-7402的样品进行了检测。 SHH蛋白的表达，核胶质瘤相关致癌基因-1（Gli1），肝癌组织中的MMP-9和P-ERK1 / 2使用免疫组织化学,Western blot 分析 Boyden小室法和伤口愈合实验被用来量化检测Bel-7402细胞的侵袭和转移。 方法 对 86例有无侵袭和转移的肝癌肝组进行织免疫组化染色 结果表明:1.Shh， Gli1，p-ERK1/2和MMP-9的表达与年龄和肿瘤直径无明显相关性 2.与肿瘤的病理分级和肿瘤转移有显着的相关性 3. Gli1的表达与MMP-9和p-ERK1／2表达也呈显著的相关性（P＜0.01） 结果—1.侵袭和转移的HCC肝组织中Shh，GLI1， p-ERK1／2，和MMP-9过表达 转移的HCC组织，Shh阳性表达，p-ERK1／2，MMP-9明显强于无转移的肝组织。Gli1在转移和非转移性HCC组织细胞核之间的表达具有显著的差异性（P＜0.01） 这些结果提示HH信号通路通过调节的MMP-9和P-ERK1 / 2蛋白表达介导人HCC的侵袭和转移。 结果表明KAAD-cyc在组织培养板的表面显著抑制肝癌细胞迁移，显着降低伤口的愈合区域，与对照组相比降低45.87%。 同时，KAAD-cyc显著下降细胞到下室的细胞的数量 分别用1μmol／L和4μmol/L KAAD-cyc 处理 24小时，Boyden小室入侵检测，抑制率分别为43.50%±15.41%和56.36%±15.17% 总的来说，这些数据表明KAAD-cycC能抑制 Bel-7402肝癌细胞的侵袭和转移 2.KAAD-cyc 抑制肝癌细胞侵袭和迁移 shh显著提高Bel-7402 细胞迁移，显着增加创面愈合的面积。 同时，当细胞在0.13μμg／ml和0.5μg/mLshh处理24 h，Shh可能增加下室BEL-7402细胞的迁移 入侵检测，在0.13μg/mL Shh增量率为49.99%±14.04%，0.5μg/mL Shh增量率为69.28%±20.29% 这些数据表明shh，大大提高 Bel-7402细 胞了迁移和侵袭能力。 shh增加肝癌Bel-7402 细胞侵袭和迁移 确定Hh信号通路是否通过ERK1／2促进肝癌细胞迁移侵袭。MAPK抑制剂，U0126和PD98059，在细胞体外采用Bel-7402细胞侵袭和迁移实验 。 Shh的显著增加BEL-7402细胞的侵袭和迁移（P＜0.01）。U0126和PD98059显著减少shh增加的Bel-7402迁移细胞数量 4.U0126和PD98059抑制Shh诱导的BEL-7402细胞迁移和侵袭 7.U0126和PD98059显著抑制MMP-9，p-ERK1／2的浓度依赖性的方式的表达。不过，U0126和PD98059都对Gli1的表达没有影响 HH信号通路通过ERK通路上调MMP-9蛋白的表达介导人肝癌的侵袭和转移 结论 1.与无转移HCC组织相比，转移HCC组织的Shh，Gli1 ，MMP-9，和P-ERK1 / 2的表达，明显增强