四川省成都经济技术开发区实验中学高考生物选修1课件：专题4.pptVIP

专题4 生物技术在其他方面的应用 要点探究 栏目导航 课前导学 走近高考 一、植物的组织培养技术 1.植物组织培养的基本过程 2.菊花组织培养过程 (1)影响植物组织培养的主要因素 ①选材:一般选择未开花植株的茎上部新生的侧枝 基础梳理 (2)实验操作过程 制备MS固体培养基:配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌 　 外植体消毒:70%的酒精消毒→无菌水清洗→0.1%的氯化汞溶液消毒→无菌水清洗 　 3.月季的花药培养 (1)花粉发育过程:花粉母细胞(小孢子母细胞)→四分体时期→单核期→双核期→花粉粒。 (2)产生花粉植株的两种途径 (3)影响花药培养的因素:主要因素是材料的选择和培养基的组成。花药培养一般选择在初花期,选择的花粉处于发育过程中的单核期。 (4)实验操作关键 ①材料的选取:挑选完全未开放的花蕾,确定花粉发育时期最常用方法是醋酸洋红法。 ②接种:灭菌后的花蕾,在无菌条件下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上。剥离花药时尽量不要损伤花药。 ③培养:温度控制在25 ℃左右,幼小植株形成后才需要光照。如果花药开裂释放出胚状体,就要在花药开裂后尽快将幼小植株分开。 二、DNA和蛋白质技术 1.DNA的粗提取与鉴定 (1)基本原理 ①DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,在0.14 mol/L的NaCl溶液中的溶解度最低。 ②DNA不溶于酒精溶液。 ③DNA在沸水浴条件下可被二苯胺染成蓝色。 (2)实验设计 ①材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织,如鸡血、菜花、洋葱等。 ②破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞,加蒸馏水,用玻璃棒搅拌,用纱布过滤,收集滤液。 ③去除杂质:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,通过控制 NaCl溶液的浓度去除杂质。 ④DNA析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液(体积分数为95%)。 ⑤DNA的鉴定:DNA溶解在2 mol/L的NaCl溶液中,加入4 mL的二苯胺试剂,沸水中加热5 min,溶液变成蓝色。 2.多聚酶链式反应扩增DNA片段 (1)PCR原理 DNA的热变性: 单链DNA 双链DNA (2)PCR的反应过程 ①变性:90 ℃以上时,双链DNA解旋为单链。 ②复性:温度下降到50 ℃左右,两种引物通过碱基互补配对方式与两条单链DNA结合。? ③延伸:温度上升到72 ℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。? 方法 原理 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小分离蛋白质 电泳法 各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同 3.血红蛋白的提取和分离 (1)方法及原理 (2)实验操作程序 样品处理:红细胞的洗涤→血红蛋白的释放→分离血红蛋白溶液 ↓ 粗分离:用透析法除去样品中相对分子质量较小的杂质 ↓ 纯化:用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化 ↓ 纯度鉴定:用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法来测定蛋白质 的相对分子质量,即对血红蛋白进行纯度鉴定 三、植物有效成分的提取 1.植物芳香油的提取 (1)植物芳香油的主要化学成分:萜类化合物及其衍生物,具有很强的挥发性。提取方法有蒸馏、压榨和萃取等。 2.胡萝卜素的提取 (1)胡萝卜素性质:不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。 (3)鉴定方法:纸层析法。 知识导图 植物组织培养技术 问题引领:(1)菊花茎的组织培养和月季的花药培养有何异同? (2)影响组织培养的因素有哪些? (3)组织培养获得成功的关键是什么? 1.菊花茎与月季花药组织培养的比较 要 点 探 究 探究点 一 比较项目 菊花茎的组织培养 月季的花药培养 不同点 材料 选取 未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 通常选择完全未开放的花蕾 光照 状况 每日用日光灯照12 h 开始不需光照,幼小植株形成后才需光照 操作 流程 制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培 选材→材料消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育 结果 正常植株 单倍体植株 相同点 ①理论基础:植物细胞的全能性。 ②基本过程:脱分化→再分化→试管苗。 ③影响因素:营养、激素、pH、温度、光照等。 2.影响植物组织培养的因素及成功的关键 (1)影响因素 ①内部因素:材料的选取。 ②外部因素:营养成分的种类及配比;植物激素的用量及使用顺序;pH、温度、光照等。 (2)获得成功的关键 ①植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗逆性差,对培养条件要求较高。 ②培养材料一旦被微生物污染,就会导致实验失败。原因是微生物增殖快,生长迅速,消耗养分多,并产生代谢废物毒害培养材料。 ③无菌技术主要包括对操作空间、实验用具、实验材料以及操作者的消毒灭菌。 【例1】 (2011河南五校联考)如图表示菊花的嫩枝