兔肝癌模型射频消融和手术切除后残癌的血管生成动态变化及hif1αvegfmmp9在肝癌超声消融后残癌的发生发展中的作用影像学与核医学专业论文.docxVIP

博士学位论文 博士学位论文 本次研究主要采用随机分组法选取由内蒙古医科大学动物中心提供的清洁 级新西兰白兔110只，6．7月龄，体质量为2300克，不限雌雄。 将北京协和医科大学所提供的VX2瘤细胞种于5只兔大腿外侧皮下，并传 代，14．28天后大腿种植肿瘤处肿瘤生长，逐层切开肿瘤组织并保留，无菌环境 下将瘤体切成lmm3的组织块，并放置于0．9％的生理盐水中，肿瘤组织研磨后 悬液分装，先．80摄氏度冰箱冻存24小时，再放置于液氮中保存，随机将105 只兔常规耳缘静脉注射麻醉剂后固定于操作台上，右侧肋弓常规手术操作，逐 层暴露腹腔，显露肝脏，用眼科手术镊斜穿入肝脏，并将以上操作传代肿瘤粒 放置入穿刺肝脏内，并用手术明胶海绵填塞，逐层关腹，饲养60天后进行超声 检查肿瘤生长情况。按照实验要求排除手术死亡、感染兔。 观察实验兔一般状况，并用实时多普勒彩色超声诊断系统GE—Logiq—E8， 探头频率为3．0．5．0MHz，测量种植肿瘤直径大小，取其中5只兔处死做肝癌标本 的病理组织切片，观察其病理变化。 统计学分析，采用SPSSl3．0软件进行计算，肿瘤直径大小用均数土标准差 表示。 结果 1．105只实验兔，其中4只由于手术感染，或者造模过程中手术操作失误， 或由于术后不明原因死亡，种植肿瘤后存活101只，在用超声对存活实验兔进 行肝脏检查时发现，其中有3只在肝脏区域不能观察到肿瘤组织高回声区域， 分析其可能由于手术操作过程失误或者种植肿瘤组织块失活造成。 2．其余98只存活荷瘤肝癌兔，其测量肿瘤大小为2．3士0．32cm，肝癌的超声 检查显示，包膜可以完整，也存在不完整的个别案例，肿瘤实质内有高回声显 现，周围暗环较宽，也有个别较窄，其主要是由于肿瘤组织推开周围小血管而 形成周围血管围绕征，肝癌结节后方回声常无明显变化，也有后方局部增强， 个别动物模型还能观察到临近组织有肿块。 3．在肝癌种植成功98只兔中随机选取5只，并处死，肝癌病理组织学切片 形态学观察无差异，均表现为肝细胞癌样变化。呈现明显的肝癌病理组织形态， III 万方数据 摘要 摘要 常伴有巨核和多核瘤细胞，细胞核大小、形状和染色不一，染色质多呈粗颗粒 状，分布不均匀，核膜肥厚，核仁分裂，核分裂呈不对称性，包浆多呈嗜碱性。 结论 1．本研究成功通过组织块埋植法建立了98只造模荷瘤肝癌兔。 2．造模荷瘤肝癌兔肝癌病理组织观察符合肝癌病理特征。 3．造模荷瘤肝癌兔肝癌超声观察符合肝癌超声影像学特征。 4．成功造模模型为下一步研究肝癌射频消融疗效及复发奠定了基础。 第二部分：兔肝癌模型射频消融和手术切除后残癌的血管生成超声 造影与血流信号相关性研究 目的 本研究主要通过动物实验连续动态观察超声消融治疗后兔肝残癌的微血管 形态学(超声造影观察)和血流信号的变化，从形态结构上研究消融治疗后肝 癌复发的过程，为超声消融后局部肿瘤复发的临床治疗奠定基础。 方弦 将第一部分实验造模成功的荷瘤肝癌兔随机选取90只，分为3大组，9d,组， 对照组10只，射频消融10％肿瘤残留组40只，再按治后选取不同时间将射频消融 10％肿瘤残留组分组t治疗后Od,时组(10只)，治疗后3天组(10只)，治疗后 7天组(10只)和治疗后14天组(10只)。手术切除肿瘤残留10％组40只，按照 术后不同时间将手术组分组：手术后Od,时组(10只)，手术后3天组(10只)， 手术后7天组(10只)和手术后14天组(10只)。射频消融10％肿瘤残留组将电 极插入肝脏肿瘤区域，偏心消融，功率由5wN50w，4分钟，阻抗到达100％时， 自动关机，肿瘤残存10％，拔出针头，缝合腹部，并给予抗炎治疗。手术切除10％ 肿瘤残留组进行常规肝脏肿瘤残存10％切除术，缝合腹壁，抗炎治疗。三组白兔 在治疗后0天、3天、7天、14天通过超声造影观察残癌的微血管生成的动态变化， 超声造影过程中保证对每例白兔检查全部参数不变(机械指数、增益及深度)， 超声检查肿瘤大小、血流信号分级，按照数字由低到高分为0、1、2、3共四级， IV 万方数据 博士学位论文 博士学位论文 O级，肿瘤组织未发现血流信号，血流活动等级为零；1级，肿瘤组织存在星点 状短的血流信号，分布较少，时而出现，时而消失；2级肿瘤组织中存在连续的 线条状血流信号，具有一定的连续血流活动；3级肿瘤组织中有较粗大血管通过， 血流速度很快。 造影剂采用意大矛UBracco公司生产的造影剂Sonovuc，其用量参照说明书。 射频仪为美国COVIDIEN治疗仪，射频功率为50．60HZ，电极针型号为双极RFA 治疗系统。 计数资料用百分率表示，计量资料用均数士标准差表示(2士s)，计数资料间 比较采用卡方检验，计量资料组间两两比较采用检验，若多个比较采用方差分 析，相