trihydrophobin1促进雄激素受体降解及其在乳腺癌进展过程中作用的研究生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

复旦大学2010届博士毕业论文中文摘要 复旦大学2010届博士毕业论文 中文摘要 第一部分Trihydrophobin 1通过促进雄激素受体降解抑制 雄激素信号机制的研究 雄激素信号通路在前列腺的发育、前列腺增生以及前列腺癌的发生发展中起极其 重要的作用。本实验室之前的研究发现trihydrophobin 1(THl)蛋白在前列腺高表达。 在体内体外实验中THl均可以与雄激素受体相互作用，并且抑制雄激素受体的转录活 性和内源性前列腺特异性抗原的表达。THl还能够与雄激素受体一同与具有雄激素反 应性的前列腺特异性抗原启动子相互结合，表明THl参与了雄激素受体转录调控其下 游基因的过程。在本论文中，我们发现在THl抑制雄激素信号通路的过程中THl能 够诱导雄激素受体蛋白水平的降低，促进了雄激素受体的泛素化降解，但是THl不影 响雄激素受体的入核。而雄激素受体的稳定性受它N／C端的相互作用影响，THl可 以抑制雄激素受体的N／C端相互作用，但是并不单独参与雄激素受体N端或C端的 降解。基于以上实验结果，我们提出THl能够通过促进雄激素受体的泛素化降解来抑 制雄激素信号的传导。这些结果还提示THl可能直接参与雄激素相关的一些发育以及 生理病理过程。 关键词：THl；雄激素受体；相互作用；泛素化；降解 中文图书分类号：Q71 复旦大学201 复旦大学201 0届博士毕业论文 第二部分 T1．ihydrophobin 1在乳腺癌进展过程中的 功能机制的研究 THl是负性转录延长因子复合体中的一个成员，与该复合体的其他亚基一同参与 转录暂停。尽管有研究发现负性转录延长因子复合体可以抑制雌激素受体a介导的转 录，但是没有研究报导THl与肿瘤的发生发展的关系。在本论文中，我们发现THl的 蛋白水平与人类乳腺癌的进展呈负相关。免疫组化实验显示THl蛋白在乳腺癌临床 IⅡ．Ⅳ期患者的乳腺癌组织中的表达明显低于乳腺癌临床I．II期的患者(P0．01)。而 在发生3个以上转移淋巴结转移患者的乳腺癌组织中THl的蛋白水平明显低于3个及以 下淋巴结转移患者的乳腺癌组织(P0．001)。为了进一步研究THl在乳腺癌发生发 展中的分子机制，我们在MDA．MB．231细胞中制作了THl过表达的稳转株，并且用 RNA干扰的方法制作了在MCF．7细胞中THl持续性下调的稳转株。我们可以观察到 THl可以抑制乳腺癌细胞的生长增殖，但是对细胞增殖的抑制作用不大。THI还能够 降低细胞周期蛋白Dl的蛋白水平，上调CDK抑制子p21的蛋白水平，使乳腺癌细胞发 生G0／G1期的细胞周期阻滞。THl还可以降低p．catenin的水平并且抑制ERK的活性。此 外，THl可以抑制乳腺癌细胞的迁移和运动，在划痕实验中，THl抑制了伤痕的修复， 抑制了上皮间质化分子标记的相应改变，提示THI可能抑制乳腺癌细胞的侵袭能力。 以上结果显示THl能够抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭，其蛋白水平的下调参与了乳腺 癌的进展过程并且为乳腺癌的诊断及治疗提供了一个新的线索。 关键词：THl；乳腺癌；进展；迁移；细胞周期；上皮间质化；侵袭 中文图书分类号；R3 4 复旦大学2010届博士毕业论文Abstract 复旦大学2010届博士毕业论文 Abstract Part I Trihydrophobin 1 Attenuates Androgen Signal Transduction Through Promoting Androgen Receptor Degradation The androgen-signaling pathway plays critical roles in normal prostate development, beIli弘prostatic hyperplasia,established prostate cancer，and in prostate carcinogenesis．In this study，we report that trihydrophobin 1(TH 1)is a potent negative regulator to attenuate the androgen signal-transduction cascade through promoting androgen receptor(AR) degradation．TH 1 interacts谢tll AR bom in vitro and in vivo，decreases the stability of A＆ and promotes AR ubiquitination in a ligand·independent manner．TH 1 also associates、Jvi