第二节 微生物的培养基.pptVIP

1.基础培养基（minimum media） 在一定条件下含有某类微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基，也称为基本培养基。 （三）按培养基对微生物的功能分类 2.加富培养基（enriched media） 在普通培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物。 Eg. 培养百日咳博德氏菌（Bordetella pertussis）需要含有血液的加富培养基。 这些特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。 3.增殖培养基（complete media） 在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其他微生物，这种培养基称为增殖培养基。常用于菌种筛选。 Eg. 要分离出能利用石蜡油进行发酵的酵母菌，只需在配方里使用石蜡油作碳源。 4.选择性培养基（selected media） 一类根据某微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基，具有使混合菌样中的劣势菌变成优势菌的功能，广泛用于菌种筛选等领域。 例如，在培养基中加入链霉素、氯霉素可以抑制原核微生物的生长，这种培养基用于分离真菌。 用于鉴别某种或某一类微生物的培养基。 一般通过加入某些试剂，使某种或某类微生物的菌落发生颜色变化，便于区别。 5.鉴别培养基： EMB培养基 伊红 美蓝------苯胺染料，抑制G+菌 低酸下----两种染料结合 大肠杆菌分解乳糖产酸 -----菌落深紫色、菌落表面有绿色金属光泽 鉴别培养基也具有选择革兰氏阴性菌的作用。 （四）发酵工厂的培养基1.孢子培养基:供菌种繁殖孢子2.种子培养基:供孢子发芽、生长和大量繁殖菌丝体，并使菌丝体长得粗壮，成为活力强的‘种子’. 3.发酵培养基:是供菌体生长、繁殖和合成产物之用。  * * 定义：指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的的营养基质，（混合养料）。 特点：任何培养基都应具备微生物所需要的六大营养要素（碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水），且应比例适当。所以一旦配成必须立即灭菌。 第二节 微生物的培养基 用途：促使微生物生长；积累代谢产物；分离微生物菌种；鉴定微生物种类；微生物细胞计数；菌种保藏；制备微生物制品。因此，它是进行科学研究，发酵生产微生物制品等的基础 一、培养基的配制原则 （一）培养基组分应适合微生物的营养特点（目的明确） （二）营养物的浓度与比例应恰当（营养协调） （三）物理化学条件适宜（条件适宜） （四）根据培养目的选择原料及其来源（经济节约） 培养基的配制4个原则 1、目的明确 培养何菌？ 自养菌？异养菌？； 种子菌？发酵菌？； 实验用？生产用？ 收获何物？ 收获菌体？收获产物？产物成分含氮如何？ 例如枯草芽孢杆菌： 一般培养：肉汤培养基或LB培养基； 自然转化：基础培养基； 观察芽孢：生孢子培养基； 产蛋白酶：以玉米粉、黄豆饼粉为主的产酶培养基； 根据不同的工作目的，微生物不同的营养需要，运用自己丰富的生物化学和微生物学知识来配制最佳的培养基。 2、营养协调 基本遵循10倍递减关系 注重C/N比 H20 （10-1） C （10-2） N （10-3） （P、S） （10-4） K、Mg （10-5） 生长因子（10-6） 培养基的配制4个原则 实验室的常用培养基： 细菌： 牛肉膏蛋白胨培养基（或简称普通肉汤培养基）； 放线菌：高氏1号合成培养基培养； 酵母菌：麦芽汁培养基； 霉菌： 查氏合成培养基； 实验室一般培养：普通常用培养基； 遗传研究：成分清楚的合成培养基； （1）选择适宜的营养物质 营养物质的浓度适宜； 营养物质之间的配比适宜； 高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长，反而起到抑制或杀菌作用。 （2）营养物质浓度及配比合适 培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和（或）代谢产物的形成和积累，其中碳氮比（C／N）的影响较大。 发酵生产谷氨酸时： 碳氮比为4/1时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少； 碳氮比为3/1时，菌体繁殖受到抑制，谷氨酸产量则大量增加。 3、理化适宜 （1）pH （2）渗透压与水活度 （3）氧化还原电位 培养基的配制4个原则 细菌： pH 7.0~8.0 放线菌：pH 7.5~8.5 酵母菌： pH 3.8~6.0 霉菌：pH 4.0~5.8 藻类： pH 6.0~7.0 原生动物： pH 6.0~8.0 初始pH 通