四川省成都经济技术开发区实验中学高考生物选修1课件：专题2.pptVIP

专题2 微生物的培养与应用 要点探究 栏目导航 课前导学 走近高考 一、微生物的实验室培养 1.培养基 (1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。 (3)分类 基础梳理 2.无菌技术 (1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止杂菌污染的方法。 (2)关键:防止外来杂菌的入侵。 (3)措施 条件 结果 常用的方法 消毒 较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子) 煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药剂消毒法 灭菌 强烈的理化因素 杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 3.纯化大肠杆菌以及菌种的保藏 (1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤:计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。 (2)纯化大肠杆菌 ①原理:在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞,使其长成单个的菌落,这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。 ②方法:平板划线法、稀释涂布平板法。 (3)菌种的保藏 ①短期保存:固体斜面培养基上4 ℃保存,菌种易被污染或产生变异。 ②长期保存:甘油瓶中-20 ℃在冷冻箱中保藏。 【思维激活】 为什么在倒平板时,等平板冷却后要将平板倒置? 提示:将平板倒置的目的是防止培养皿盖上的水珠滴落到平板上造成污染。 二、土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 1.菌种筛选:使用尿素是唯一氮源的选择培养基培养。 2.统计菌落数目:常用方法有稀释涂布平板法、显微镜直接计数法。 3.细菌分离与计数的实验流程:土壤取样→配制培养基→微生物的培养与观察→细菌的计数。 三、分解纤维素的微生物的分离 1.纤维素酶 (1)组成:纤维素酶是一种复合酶,它包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。 (2)作用 2.菌种筛选 (1)方法:刚果红染色法。 (2)原理 →红色复合物 红色消失、出现透明圈 即:使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基,根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。 3.筛选流程 土壤取样:富含纤维素的环境 　↓ 选择培养:用选择培养基培养,以增加纤维素分解菌的数量 　↓ 梯度稀释 　↓ 涂布平板:将样品涂布于含CR的鉴别纤维素分解菌的培养基上 　↓ 挑选产生透明圈的菌落:产生纤维素酶的菌落周围出现透明圈 知识导图 微生物的实验室培养 问题引领:(1)固体培养基有哪些用途? (2)平板划线每次灼烧接种环的目的相同吗? 1.培养基的种类 (1)按物理性质分类 培养基种类 特点 用途 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 固体培养基 加凝固剂 (如琼脂) 微生物分离、鉴定,活菌计数,菌种保藏 要 点 探 究 探究点 一 种类 制备方法 原理 用途 举例 选择 培养基 培养基中加入某些化学物质 依据某些微生物对某些物质的抗性而设计 从众多微生物中分离所需的微生物 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 鉴别 培养基 培养基中加入某种试剂或化学药品 依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中的特定试剂或化学药品反应,产生明显的特征变化而设计 鉴别不同种类的微生物 伊红—美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌 (2)按功能分类 2.培养基的配制原则及注意事项 (2)配制牛肉膏蛋白胨固体培养基的注意事项 ①倒平板的适宜温度一般在50 ℃左右,温度过高会烫手,过低培养基又会凝固。 ②平板需倒置,这样既可使培养基表面的水分更好地挥发,又可防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。 方法 平板划线法 稀释涂布平板法 注意事项 (1)接种环的灼烧:①第一次划线前:杀死接种环上的微生物,避免污染培养物;②每次划线前:杀死残留菌种,保证每次划线菌种来自上次划线末端;③划线结束后:杀死残留菌种,避免污染环境和感染操作者。 (2)灼烧接种环之后,要冷却后再进行操作,以免温度太高杀死菌种。 (3)划线时最后一区域不要与第一区域相连。 (4)划线用力要大小适当,防止用力过大将培养基划破。 (1)稀释操作时:每支试管及其中的9 mL水、移液管等均需灭菌;操作时,试管口和移液管应在离火焰 1 cm~2 cm处。 (2)涂布平板时:①涂布器用体积分数为70%酒精消毒,取出时,让多余酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃;②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精;③酒精灯与培养皿距离要合适,移液管管头不要接触任何物体。 目的 在培养基上形成由单个菌种繁殖而来的子细胞群体——菌落 3.微生物的纯化培养——平板划线法与稀释涂布平板法 【例1】 氯苯化合物是重要的有机化工原料,因其不易降解,会污染环境。某研究小组依照下列实验方案(图1)筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌。培养基配方如表所示。 液体 培养基 蛋白胨 牛肉膏 氯苯 氯化钠 硝酸铵 无机盐 (无碳) 蒸馏 水 Ⅰ