靶向阻断神经激肽1受体抑制白血病细胞增殖的机制及其对白血病骨癌痛的作用研究生物学专业论文.docxVIP

浙江理工大学硕士学位论文 浙江理工大学硕士学位论文 靶向阻断神经激肽1受体抑制白血病细胞 增殖的机制及其对白血病骨癌痛的作用研究 痛，HE染色结果显示胫骨注射K562细胞后出现了骨边缘破损，骨皮质脱落至 骨髓腔等骨组织破坏情况，这与癌痛的行为学指标相一致；采用Western blotting 研究结果显示SRl40333缓解白血病骨癌痛的机制与其阻滞细胞周期和诱导细胞 凋亡有关；另外，Western blotting和免疫组化的研究结果也显示SRl40333缓解 白血病骨癌痛的机制也与提高内源性阿片肽和阿片受体如POMC和MOR的表 达有关。 另外，我们采用蛋白质组学技术和转录组学技术进一步研究了SRl40333靶 向阻断K562细胞中的NKlR后在组学水平对K562细胞生长的调控作用。在 SRl40333处理后我们在定量蛋白质组学水平鉴定出了的5310个差异蛋白，这些 差异蛋白中有713个发生显著上调，有401个发生了显著下调。赖氨酸乙酰化修 饰组学水平，我们发现在1571种蛋白中共有3474个赖氨酸乙酰化位点发生了差 异表达修饰，有92个赖氨酸乙酰化位点中的120个位点发生显著上调，有229 个赖氨酸乙酰化位点中的336个位点发生显著下调。 在转录组学研究中，我们的研究结果显示SRl40333靶向阻断NKlR后在 K562细胞中引起了810个基因的差异转录，其中117个基因转录上调，693个 基因转录下调。 总之，采用NKlR第三代高选择性和高特异性的拮抗剂SRl40333靶向阻断 白血病K562细胞中的NKlR后能在细胞水平和动物水平显著抑制白血病细胞的 增殖，同时也能缓解白血病骨癌痛，该作用的分子机制与SRl40333引起了白血 病K562细胞周期阻滞、诱导白血病K562细胞发生凋亡相关。同时，定量蛋白 质组学和赖氨酸乙酰化修饰组学的结果以及转录组学的结果为我们提供了大量 与细胞周期和细胞凋亡信号通路相关的差异蛋白，后续对这些差异蛋白的研究为 我们深入理解靶向阻断NKlR抑制白血病细胞增殖的分子机制提供了新的线索 和思路。通过后续的深入研究有望将SRl40333开发为新的白血病治疗的药物。 关键词：K562细胞；SRl40333；神经激肽1受体；白血病骨癌痛；蛋白质组学； 赖氨酸乙酰化；转录组学 万方数据 浙江理工大学硕士学位论文 浙江理工大学硕士学位论文 靶向阻断神经激肽1受体抑制白血病细胞 增殖的机制及其对白血病骨癌痛的作用研究 Abstract Leukemia，a kind of malignant of hematopoietic system，is serious threat to human health．The number of cases is more than 300 thousand per year worldwide．As for the mortality,leukemia ranks first in malignant cancer among children and adults under 35 years old．Meanwhile，bone cancer pain induced by leukemia has been affecting the quality of life of patients severely．However,at the present，clinical medication of leukemia is inefficient insufficient and poor selective． Therefore，it has always been hot pot to find and develop more effective drugs and reduce the side and toxic effects as well as improve the cure rate． The classical members of tachykinin include substance P(SP)and Neurokinin Receptor 1(NK 1 R)，playing a role in various physiological pathological events． For example，SP is important kind of excitatory neurotransmitter；the expression of NK 1 R is increased in number of tumor types that NK 1 R could be new therapeutic target an