几种中草药粗提物及茋类化合物对细菌群体感应抑制活性的研究生物化工专业论文.docxVIP

硕士学位论文 硕士学位论文 天然中草药粗提物及芪类化合物对细菌群体感应抑制效应的研究 摘 要 长期以来，传统抗生素的广泛使用已经导致了多重耐药菌的出现，细菌的耐 药性已严重威胁到人类的生命健康。近年来的研究发现，细菌的群体感应 (Quorum sensing，QS)系统调控着细菌的一些重要生理功能，包括致病菌毒力 因子的产生及生物被膜的形成。因此，寻找合适的群体感应抑制剂(Quorum sensing inhibitors，QSIs)调控细菌的群体感应系统，在不杀死致病菌的前提下降 低其致病性，进而减少抗生素的使用量，避免耐药菌株的形成，可以成为治疗细 菌感染的新型策略。 本论文以紫色杆菌(Chromobacterium Violaceum)CV026及根癌农杆菌 (Agrobacterium tumefaciens)KYC55为报告菌株，对10种常见的中草药粗提物 及本实验室已从中草药中分离纯化的小分子化合物进行群体感应抑制活性筛选， 从中得到SJY．10粗提物只能够干扰KYC55的群体感应系统，但不能干扰CV026 的群体感应系统，其抑制活性明显高于阳性对照大蒜粗提物的抑制活性；而 SJY．1粗提物及白藜芦醇只能够干扰CV026的群体感应系统，但不能干扰KYC55 的群体感应系统，其中，芪类化合物白藜芦醇的群体感应抑制活性显著高于阳性 对照大蒜粗提物的抑制活性。 随后，本论文又以包括白藜芦醇在内的十种结构相似的芪类化合物为研究对 象，以紫色杆菌CV026为报告菌株，对其进行群体感应抑制活性筛选，并对其 潜在的构效关系进行阐释。除二苯乙烯单体化合物白藜芦醇以外，本论文首次报 道了白皮杉醇及氧化白藜芦醇也具有显著的群体感应抑制活性；随后的紫色色素 提取法进一步验证了白藜芦醇、白皮杉醇及氧化白藜芦醇的群体感应抑制活性： 在亚致死浓度下，这三种化合物均能显著地紫色杆菌中紫色色素的产生，且抑制 活性与药物浓度呈现出明显的剂量依赖效应。 铜绿假单胞菌是临床上最常见的能够引起严重获得性感染的机会致病菌之 一，其毒力因子的产生由群体感应系统调控。本论文中也研究了在亚致死浓度下 白藜芦醇、白皮杉醇及氧化白藜芦醇对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa) PA01的群体感应系统的影响。实验结果表明，在不影响菌体生长的前提下，白 藜芦醇、白皮杉醇及氧化白藜芦醇均能显著地抑制铜绿假单胞菌PA01绿脓菌素 的产生及群集运动；进一步的转录组学实验显示，这三种化合物能够显著下调铜 绿假单胞菌PA01的群体感应调控基因：埘、lasR、rhlR及rhlI。 万方数据 摘 摘 要． 堡主堂垡丝茎 关键词：群体感应，群体感应抑制剂，中草药粗提物，芪类化合物，紫色杆菌 CV026，铜绿假单胞菌PA01 万方数据 硕士学位论文 硕士学位论文 天然中草药粗提物及芪类化合物对细菌群体感应抑制效应的研究 Abstract For a long time，the widespread use of traditional antibiotics has led to the emergence of multi-drug·resistant pathogenic bacteria．Those multi—drug-resistant pathogenic bacteria have been a serious threat to human’S life and health．Recent studies have shown that bacteria use quorum sensing(QS)system to regulates a number of important physiological functions，such as the production of virulence factor and the formation of biofilm in pathogen．In this case，disturbing the quorum sensing system by appropriate quorum sensing inhibitors(QSls)may be a promising alternative strategy to fight bacterial infections especially those caused by multidrug resistant bacterial strains．QSIs call reduce the pathogenicity of pathoge