空肠弯曲菌致豚鼠不同时间段周围神经病理损伤的研究神经病学专业论文.docxVIP

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空肠弯曲菌致豚鼠不同时间段周围神经病理损伤的研究神经病学专业论文

优秀毕业论文 精品参考文献资料 河北医科大学 河北医科大学 学位论文使用授权及知识产权归属承诺 本学位论文在导师(或指导小组)的指导下,由本人独立完成。 本学位论文研究所获的研究成果,其知识产权归河北医科大学所有。 河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与 学位论文主要内容相关的论文,第一署名单位为河北医科大学,试 验材料、原始数据、申报的专利等知识产权归河北医科大学所有。 日 河北医科大学 研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果,除 了文中特别加以标注等内容外,文中不包括其他人已经发表或撰写 的研究成果,指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写, 文责自负。 研究生签名:席≥稀 导师签章御群歹年; 月弘日 万方数据 目 目 录 中文摘要 一1 英文摘要 .5 英文缩写 .9 研究论文空肠弯曲菌致豚鼠不同时间段周围神经病理损伤的研究 前言日lJ吾 10lU 材料与方法 10 结果 20 附图 23 讨{仑 3 1 结论 35 参考文献 35 综述 37 致谢 52 个人简历 塑 万方数据 中文摘要空肠弯曲菌致豚鼠不同时间段周围神经病理损伤的研究 中文摘要 空肠弯曲菌致豚鼠不同时间段周围神经病理损伤的研究 摘 要 目的 1通过经消化道感染空肠弯曲菌(Campylobacterjejuni,C.jejuni), 构建豚鼠周围神经损伤模型。 2观察豚鼠经消化道感染空肠弯曲菌后,不同时间段内周围神经的 病理损伤有何差异,从而为建立空肠弯曲菌相关的周围神经病的动物模 型提供参考依据。 方法 1制备空肠弯曲菌菌悬液 选取白AMAM型GBS患者粪便中分离、培养的空肠弯曲菌lulei 株,经中国和美国疾病预防控制中心鉴定为空肠弯曲菌。将该菌在42℃ 微需氧条件下(1 0%C02、5%02、85%N2)培养24小时后传代至哥伦比 亚血平板培养基上,培养24小时,并连续传至第3代纯化菌株。并经革 兰氏染色、马尿酸水解实验以及分子生物学进行细菌鉴定后,收取菌株 制备成浓度为3×1 09CFU/ml的菌悬液。 2实验动物分组 购买SPF级4周龄Hartley豚鼠55只,饲养一周。按照体重、体重 增长速度及毛色等条件筛选出50只健康豚鼠。将筛选出的50只健康豚鼠, 随机分为布氏肉汤组A(10只)、空白对照组B(10只)、实验组E(30 只)。 根据不同的解剖时间(末次灌喂后第1、2、3、4、5周)将布氏肉汤 组和对照组再次随机分成5个亚组(各2只),布氏肉汤组A分别标记 为A1、A2、A3、A4、A5;空白对照组B分别标记为B 1、B2、B3、B4、 B5; 根据不同的解剖时间(末次灌喂后第1、2、3、4、5周)将实验组 30只豚鼠再次随机分为5个亚组(各6只),分别标记为E1、E2、E3、 E4、E5组。 若豚鼠出现瘫痪等明显的临床症状,因实验组的干预处理是统一的, 万方数据 中文摘要可以将发生瘫痪的豚鼠合并为一组, 中文摘要 可以将发生瘫痪的豚鼠合并为一组, 标记为实验组T。筛选后余下的5 只豚鼠继续饲养,设为备用对照组, 其中3只处理同布氏肉汤组,2只 同空白对照组。 3造模方案 实验组(E组)豚鼠给予灌喂活菌菌悬液,每只豚鼠在每次灌喂前 禁食15小时、禁水4小时。每周中连续3天进行灌喂菌液(1次/天), 共进行三周,每周的灌喂时间相同。每只豚鼠灌喂完毕后,间隔半小时 后立即给予食物及无菌水。实验组每只豚鼠每次灌喂3 10 9CFU/ml的空 肠弯曲菌菌悬液lml;A组(布氏肉汤对照组)给予灭菌的布氏肉汤lml; B组(空白对照组)不予处理。 4实验动物观察及标本取材 自灌喂当日起每日观察豚鼠的临床症状(参考Hartley豚鼠EAN模 型的评分标准,发病程度分为0---5级。0级:正常;1级:两后脚趾稍 拖拽地面;2级:两后脚趾明显拖地;3级:两后肢显著拖地,两后肢偏 向同一侧;4级:两后肢完全瘫痪;5级:四肢均瘫痪,甚至呼吸抑制【lJ), 定期称量豚鼠体重,观察豚鼠的活动能力、精神状况以及皮毛色泽,有 无腹泻等。 于末次灌喂后第l,2,3,4,5周分批解剖相应的组别A1、B1、 E1,A2、B2、E2,A3、B3、E3,A4、B4、E4,A5、B5、E5组。4% 水合氯醛(10ug/g)麻醉豚鼠,灌注解剖后,分别取同侧坐骨神经近端 保存于4%多聚甲醛中,择期进行锇酸染色观察周围神经病变。 5数据统计分析 每个实验标本经锇酸染色后,随机挑选1 00根神经单丝,于光镜下 进行观察,统计出有病变的神经单丝个数,计算出发病率(病变单丝数 /100100%),采用统计学软件SPSSl3.0根据病变率进行f检验。 结果 1实验动物观察 1.1临床症状 豚鼠经空肠弯曲菌灌喂结束后,实验组中共

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