肠道缺血再灌注致远隔组织损伤时tlr4与hmgb1及下游信号途径的研究外科学专业论文.docxVIP

研究生优秀毕业论文 中国医学科学院北京协和医学院硕士论文5．HMGBl、NF．1cB、MyD88和TRIF的基因表达(PT-qPCR) 中国医学科学院北京协和医学院硕士论文 5．HMGBl、NF．1cB、MyD88和TRIF的基因表达(PT-qPCR) ．28 (四)统计学处理： 35 实验结果 36 一、血浆中炎症因子的变化 ．36 二、肝脏和肺脏组织中的MPO活性 ．．36 三、肠道和肺脏的形态学改变(光镜检查，H．E染色) ．37 四、肺和回肠的基因表达 ．40 五、肺脏及空、回肠组织HMGBl和NF-lcB的蛋白表达 4l 讨论 ．．43 一、小鼠肠道缺血再灌注操作 ．43 二、小鼠尾静脉注射技术 ．44 三、炎症因子与缺血再灌注损伤 ．45 四、HMGBl与肠道缺血再灌注损伤 ．．47 五、TLR4与肠道缺血再灌注损伤 ．．5 1 六、HMGBl．TLR4与肠道缺血再灌注损伤 ．．5 1 七、MYD88依赖性和TRIF依赖性途径在肠道缺血再灌注损伤中的作用 53 八、NF．1cB在肠道缺血再灌注损伤中的作用 ．53 结论 ．．55 参考文献 ．56 综j2罡 ．．67 硕士期间发表论文及著作 80 致谢 ．．81 独创性声明 83 万方数据 中国医学科学院北京协和医学院硕上论文中文摘要 中国医学科学院北京协和医学院硕上论文 中文摘要 目的：应用不同的抗体蛋白研究小鼠肠道缺血／再灌注致远隔组织损伤时， TLR4一HMGBl及其下游信号途径的作用。 方法：SPF级雄性C57BL／6小鼠40只，随机分为5组：sham、control、anti．HMGBl、 anti—MyD88和anti—TRIF，每组8只。Control、anti-HMGB 1、anti—MyD88和anti—TRIF 组在行肠道缺血／再灌注手术前30min分别经尾静脉注射对照IgG、HMGB 1、MyD88 和TRIF抗体(剂量为lmg／kg，浓度为0．025％)。所有小鼠麻醉，开腹后，钝性分 离暴露肠系膜上动脉(superior mesenteric artery，SMA)。除sham组外的四组用无 创血管夹夹闭肠系膜上动脉60min后松夹再灌注60min，sham组只开腹120min， 不进行缺血再灌注。术后取材，检测血浆NF．KB p65、IL．6及TNF．0【浓度；肺脏和 肝脏MPO的活性；肺和肠道组织形态学变化和HMGBl与NF—KB的mRNA和蛋白 表达。应用单因素方差分析检验进行统计学处理。 结果：在小鼠肠道缺血再灌注损伤中，与对照组比较，在缺血前通过注射抗体阻断 HMGBl、MyD88和TRIF的表达能明显的降低血浆炎症因子NF．KB、IL．6及TNF．仪 的水平，同时减轻了肺脏和小肠组织的损伤。anti—HMGBl抗体、anti—MyD88抗体 和anti—TRIF抗体的应用能明显的减轻缺血再灌注引起的组织损伤，提示了其治疗 性的作用，其中anti．HMGBl抗体的作用最为显著。 结论：HMGBI及其下游信号途径在小鼠肠道缺血再灌注损伤中具有重要作用，在 二条下游信号途径中，TRIF依赖途径所起的作用比MyD88依赖途径稍大些。 关键词：C57BL／6小鼠；肠道缺血／再灌注；HMGBl；MyD88；TRIF 万方数据 英文摘要(Abstract)Objective：To 英文摘要(Abstract) Objective：To characterize HMGB 1一TLR4 and downstream signalling pathways in intestinal ischemia／reperfusion(I／R)injury． Methods：40 Specific．．Pathogen．．Free male C57BL／6 mice were randomly divided into five groups(n=8 per group)：sham，control，anti-HMGBl，anti-MyD88，and anti—TRIF antibody groups．The control IgG antibody,or anti-HMGB 1，or anti-MyD88，or anti．TRIF antibodies(all，1 meCkg，0．025％)were injected via the caudal vein 30 min prior to ischemia．After anesthetization，the abdominal wall was opened and the superior mesenteric artery was exposed，followed by 60 min