百草枯对人胚胎神经干细胞损伤的机制研究卫生毒理学专业论文.docxVIP

复 复 口大学 20 0 8 级 硕 }一研 究 生 毕 业 论 文 百 草枯 对 人 胚 胎 神 经 十 细 胞 损 伤 的 机 制 研 究 利 用 活 性 氧 检 测 试 剂 盒 、caspase3 活 性 检 测 试 剂 盒 、细 胞 内钙 离 子 浓 度 测 定 试 剂 盒 对 染 毒 后 细 胞 内 R o s 水 平 、casp ose3 活 性 、钙 离 子 浓 度 进 行 检 测 ， 发 现 p Q 可 以 显 著 提 高 细 胞 内 R o s 水 平 ( p Q ) 10 p M )、 Casp ase 3 活 性 ( pQ ) 10 0 p M ) 、 钙 离 子 浓 度 ( pQ ) l o M )，ca印。se 3 活 性 、 钙 离 子 浓 度 随 pQ 浓 度 的升 高 而 升 高 ， 呈 明 显 剂 量 效 应 关 系 。 该 结 果 表 明 pQ 可 以抑 制 Re N ce }1Cx 细 胞 的 增 殖 ， 引 起 细 胞 内氧 化 还 原 系 统 失 衡 ，诱 导 细 胞 凋 亡 的 发 生 。 2 .2 百 草 枯 对 R e N eellCX 细 胞 金 属 硫 蛋 白111表 达 的 影 响 利 用 荧 光 定 量 p C R 技 术 检 测 p Q 染 毒 24h 后 细 胞 M T--川 m R N A 的 表 达 情 况 。 不 同浓 度 的 pQ 可 以先 上 调 而 后 下 调 M T-lll m R N A 的 表 达 情 况 。M T-lll m R N A 表 达 的 上 调 可 以缓 解 一 定浓 度 内 p Q 氧 化 应 激 产 生 的 活 性 氧 对 细 胞 产 生 的 影 响 ，从 而 保 护 细 胞 。 2 .3 百草 枯 对 R e N 。ellC x 细 胞 分 化 的 影 响 利 用 荧 光 定 量 pC R 技 术 检 测 N s cS 标 志 物 n estin 、soxio ，神 经 元 标 志 物 N r一6 5 、 NF 一20 0 ，功 能 学 受 体 N M o A 一R 和 G A BA A一R ， 星 形 胶 质 细 胞 标 志 物 G FA p ，凋 亡 相 关 基 因 b elZ m R N A 的 表 达 情 况 。 PQ 可 以上 调 Re N ee llCX 细 胞 ne stin 、 bcIZ m R N A 的 表 达 ，抑 制 soxio 、N F一6 5 、N F一2 00 、N M o A 一R ZA m R N A 的 表 达 ，对 G FA p 、6 A B A A一R m R N A 的 表 达 无 影 响 。 该结 果 表 明 pQ 可 以在 分 化 早 期 提 前 启 动 分 化 进 程 ， 并 抑 制 Re N ce llC X 细 胞 向神 经 元 方 向 的 分 化 ， 影 响 其 功 能 成 熟 。 p Q 对 分 化 产 生 影 响 的浓 度 低 于 其 抑 制 细 胞 增 殖 的浓 度 。 3 百 草 枯 对 Re N 。ell c x 细 胞 分 化 信 号 通 路 的影 响 3 .1 百草 枯 对 R e N cell CX 细 胞 分 化 过 程 中 w nt 信 号 分 子 表 达 的 影 响 利 用 荧 光 定 量 p C R 技 术 检 测 w nt 信 号 通 路 关 键 分 子 p 一caten in和 D V L Z m R N A 的 表 达 情 况 。p Q 可 显 著 下 调 p 一cate门in 和 。v LZ m R N A 的 表 达 ，其 中 D V L Z m R N A 下 调 的 程 度 与 pQ 浓 度 之 问存 在 明显 的 剂 量 反 应 关 系 。 3 .2 百 草 枯 对 R e N Ce.}CX 细 胞 分 化 过 程 中 闪otoh 信 号 分 子 表 达 的 影 响 利 用 荧 光 定 量 pc R 技 术 检 测 N otch 信 号 通 路 关 键 受 体 N otch l 、配 体 」ag ge d l 和 下 游 分 子 。丁x i m R 闪A 的表 达 情 况 。pQ 在 分 化 初 期 可 以下 调 N oteh i 、Jagge d i 和 。丁x l 的 表 达 ，分 化 中 期 会 上 调 N otCh l 的 表 达 ，但 在 分 化 晚 期 至 结 束 阶 段 ，p Q 复 复 口.人 学 2 00 8 级 硕 卜研 究 生 毕 业 论