氟伐他汀抗动脉粥样硬化形成机制的研究内科心血管专业论文.docxVIP

原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独 赢进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不 包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研 究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完 全意识到本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名： 夏垂尚鸟 日期：查翌2：之矽 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解山东大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学 校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论 文被查阅和借阅：本人授权山东大学可以将本学位论文的全部或部分 内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段 保存论文和汇编本学位论文。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名：轻立垫导师签名： 日期：扩3-争巧一 山东大学博士学位论文论文I 山东大学博士学位论文 论文I 氟伐他汀对C反应蛋白诱导人脐静脉内皮细胞 NF．K B活性及表达粘附分子的影响 博士研究生 吕琳 博士生导师 朱兴雷教授 中文摘要 背景：内皮细胞损伤是动脉粥样硬化(atherosclerosis，As)发生的启动步骤。内 皮细胞受损时表达粘附分子增加，粘附分子在介导单核细胞向内皮粘附、迁移过程中 起极其重要作用，而单核细胞向内皮粘附、迁入内皮下间隙是As中最早期病变。c 反应蛋白(C reactive protein，CRP)作为炎症的一种敏感性指标，与As的发生、发 展及预后密切相关，实验和病理资料均提示CRP参与了As的形成。CRP对人血管 内皮细胞有直接的致炎症效应。核因子K B(nuclear factor kappa B，NF—K B)作为一种 转录因子已被发现参与调节多种炎症蛋白的基因表达。NF—K B存在于As病变的主 要组成细胞即内皮细胞、单核细胞及血管平滑肌细胞细胞中。NF．K B靶基因包括炎 症的细胞因子、粘附分子、趋化因子及生长因子，这些因子对细胞的活化、趋化、浸 润及增殖起调控作用，他汀类药物除降脂作用外，还有抗As形成的作用，已有研究 证实他汀类药物抗As机制与NF．K B有关。CRP刺激人脐静脉内皮细胞粘附分子表 达国外已有研究，但CRP是否通过NF—K B通路调节粘附分子表达还未见报道。他 汀类药物对上述机制是否影响亦末见报道。 目的：用CRP作用于人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells， HUVECs)探讨：(1)CRP对HUVECs NF．K B活性的影响：(2)CRP对HUVECs 表达ICAM．1(Intercellular adhesion molecule一1)、VCAM．1(Vascular cell adhesion molecule-1)；(3)CRP是否通过NF—K B通路诱导ICAM一1、VCAM．1表达；(4)氟 山东大学博士学位论文伐他汀(Flu，Fluvastatin)对CRP诱导的HUVECs 山东大学博士学位论文 伐他汀(Flu，Fluvastatin)对CRP诱导的HUVECs NF．kB活性、ICAM一1、VCAM一1 表达的影响。 方法：取胎儿脐带静脉进行人脐静脉内皮细胞原代培养，并用VIII因子进行 HUVECs鉴定，取第3—5代HUVECs进行实验。HUVECs分为：(1)正常对照组： 未刺激的HUVECs；(2)CRP组：以不同浓度CRP(5 u g／ml，10u g／ml，50u g／ml 及100 u g／m1)刺激HUVECs，并刺激不同时间(6h，12h，24h)；(3)氟伐他汀组： CLIP+氟伐他汀(1×10～，1×10一，1×10一mol／L)；(4)PDTC组：CRP刺激HUVECs 培养同时加入浓度为1001amol／L的PDTC，PDTC为NF．K B抑制剂二硫代氨基甲酸 咯烷。用免疫组织化学法测培养的HUVECsNF—K B活性：原位杂交测NF—K B mRNA 表达；用ELISA法测ICAM一1、VCAM．1含量；RT—PCR测ICAM。1、VCAM一1 mRNA 表达。 结果：(1)各组培养HUVECsNF-KBmRNA少量表达，NF—K B未见胞核染色 阳性表达即NF—K B无活性；(2)对照组HUVECs产生少量ICAM．1，RT—PCR示 ICAM．1 mRNA少量表达，VCAM．1无蛋白及mRNA表达：(3)CRP组ICAM．1、 VCAM．1蛋白及mRNA表达明显增强(pO．01)，ELISA结果显示ICAM．1、VCAM。1 呈浓度及时间依赖性(p0．01)，但随CRP浓度增强，100u g／ml CRP较