常用培养基79892.doc

1、Ampicillin (100mg/ml) □组份浓度 lOOmg/ml Ampicillin □配制量50mL □配制方法1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。 加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。 用0.22pm滤膜过滤除菌。 小份分装（ImL/份）后，?20°C保存。 2、IPTG (24mg/mL) □组份浓度24mg/mL 1PTG □配制量50mL □配制方法1.称量1.2g IPTG置于50mL离心管屮。 加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。 用0.22pm滤膜过滤除菌。 小份分装（ImL/份）后，?20°C保存。 3、X- Gal (20mg/mL) □组份浓度 20mg/mL X- Gal 口配制量50mL □配制方法1.称取lgX-Gal置于50mL离心管中。 2.加入40mL DMF （二甲基甲酰胺），充分混合溶解后，定 容至50mLo 3.小份分装（ImL/份）后，?20°C保存。 4、LB 培养基 □组份浓度 1% （W/V） Tryptone, 0.5% （W/V） Yeast Extract, I % （W/V） NaCl □配制量IL □配制方法1.称蜃下列试剂，置于1L烧杯屮 Tryptone 10g； Yeast Extract 5g: NaCl lOg 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。 滴加 5N NaOH （约 0.2mL）,调节 pH 值至 7.0。 高温高压灭菌后，4°C保存。 LB/Amp培养基 □组份浓度1% （W/V） Tryptone 0.5% (W/V) Yeast Extract 1% (W/V) NaCl 0」m g/mL Ampicillin □配制量1L □配制方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中 Tryptone log Yeast Extract 5g NaCl 10g 2.加入约800mL的去离了水，充分搅拌溶解。 5、 滴加 5N NaOH （约 0.2mL）,调节 pH 值至 7.0。 加去离子水将培养基定容至lLo 咼温咼压火菌后，冷却至家温。 加入 ImL Ampicillin (100mg/mL)后均匀混合。 7?4°C保存。 6 TB培养基□组份浓度 1.2% 6 TB培养基 lOOmLo lOOmLo 盐缓冲液。 盐缓冲液。 2.4% (W/V) 2.4% (W/V) 0.4% (V/V) 17mM 72mM Yeast Extract Glycerol KH2PO4 K2HPO4 □配制量 □配制量IL □配制方法1.配制磷酸盐缓冲液(0.17M KH2PO4, 0.72M K2HPO4) 称取卜列试剂，Tryptone 称取卜列试剂， Tryptone Yeast Extract Glycerol 置于1L烧杯屮。 12g 24g 4mL 加入约 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。 加去离子水将培养基定容至1L后，高温高压灭菌。 待溶液冷却至60°C以下时，加入100mL的上述灭菌磷酸 6?4°C 6?4°C保存。 7. TB/Apm培养基 □纟R份浓度 1.2% (W/V) Tryptone 2.4% (W/V) 2.4% (W/V) Yeast Extract 0.4% (V/V) Glycerol KH2PO4K2HPO4 KH2PO4 K2HPO4 Ampicillin 72mM 0.1mg/mL □配制量IL □配制方法1.配制磷酸盐缓冲液(0-17M KH2PO4, 0.72M K2HPO4) lOOmLo 溶解2.31g KH2PO4和2.54g K2HPO4于90mL的去离子水 中,搅拌溶解后, 加去离了水定容至100mL,高温高压灭菌。 2.称取下列试剂，置于1L烧杯中。 TOC \o 1-5 \h \z Tryptone 12g Yeast Extract 24g Glycerol 4mL 加入约SOOmL的去离子水，充分搅拌溶解。 加去离子水将培养基定容至1L后，高温高压灭菌。 待溶液冷却至60°C以下时，加入100mL的上述火菌磷酸盐 缓冲液和 1 mL Ampicillin (100mg/mL)。 均匀混合后4°C保存。 8、SOB培养基 □组份浓度 2% (W/V) Tryptone 0.5% (W/V) Yeast Extract 0.05% (W/V) NaCI 2.5mM KC1 lOmM MgC12 □配制量IL □配制方法L配制250mM KC1溶液。 在90mL的去离子水中溶解1.86g KC1后，定容至lOOmLo 2.配制2M MgC12溶液。 在90mL的去离了水中溶解19g MgC12后，定容至100mL, 高温高压灭