miR-125b通过下调MCL-1的表达提高肝癌肿瘤干细胞对多-检验医学.PDFVIP

检验医学 2016 年 11 月第 31 卷第 11 期 Laboratory Medicine ，November 2016 ，Vol. 31，No. 11 ·981 · 文章编号 ：1673-8640 （2016 ）011-0981-06 中图分类号 ：R446.1 文献标志码 ：A DOI ：10.3969/j .issn.1673-8640.2016.011.013 miR-125b 通过下调 MCL-1 的表达提高肝癌肿瘤干细胞对 多柔比星的敏感性 1 1 2 洪东承 ，张本宏 ，龚彬彬 （1.杭州市拱墅区中西医结合医院检验科 ，浙江 杭州 310010 ； 2.温州医科大学附属第二医院检验科 ，浙江 温州 325000 ） 摘要 ：目的　探讨微小RNA- 125b （miR- 125b ）是否能增强多柔 比星对肝癌HepG2细胞系肿瘤干细胞 （简 称HepG2肿瘤干细胞 ）的杀伤活性并研究其机制 。方法　将HepG2细胞用miR- 125b 、多柔 比星及髓细胞 白血 病-1 （MCL-1 ）质粒作不 同处理 。采用流式细胞术检测HepG2肿瘤干细胞 比例 ，采用噻唑蓝 （MTT ）法检测细 胞活力 ，采用Annexin V染色法检测细胞凋亡率 ，采用JC- 1染色法测定细胞线粒体膜 电位 ，采用免疫印迹法检 测 目标蛋 白[MCL- 1、半胱氨酸天冬氨酸蛋 白酶-9 （caspase-9 ）、半胱氨酸天冬氨酸蛋 白酶-3 （caspase-3 ）]的 表达 。结果　多柔 比星单独使用能提高HepG2细胞系中肿瘤干细胞 的比例 ，联用miR-125b后HepG2肿瘤干细胞 的比例显著下降。MTT法和流式细胞术结果表 明miR- 125b可显著增强多柔 比星对HepG2肿瘤干细胞 的杀伤活 性和凋亡诱导活性 。JC-1染色实验结果表明miR-125b可显著增强多柔 比星对HepG2肿瘤干细胞线粒体 的损伤 。 免疫印迹法结果表明miR-125b可显著增强多柔 比星依赖 的caspase-9和caspase-3的活化 。MCL-1质粒能明显抑制 miR- 125b对多柔 比星的协 同作用 ，降低二者联合作用对HepG2肿瘤干细胞活力 的抑制和凋亡 的诱导 。结论　 miR-125b通过下调MCL-1的表达能提高HepG2肿瘤干细胞对多柔 比星的敏感性 。 关键词 ：微小RNA-125b ；多柔 比星 ；肝癌 ；肿瘤干细胞 ；髓细胞 白血病基 因1；细胞凋亡 MiR-125b increasing the susceptibility of hepatic cancer stem cells to doxorubicin through down-regulating the expression of MCL-1 H ON G Dongcheng 1 1 2 ，ZHAN G Benhong ，GON G Binbin . （1. Dep artment of Clinical L aboratory ，I nteg rated Chinese and Wes tern M edicine H osp ital of Gongshu D is trict ，H angz hou 3 100 10 ， Zhej iang ，China ；2. D ep artment of Clinical Laboratory ，the Second Aff iliated Hosp ital of Wenzhou M edical University ，Wenzhou 325000，Zhej iang ，China