常用培养基配方79119.doc

修改记录单 版木 时间 简述 A 2003-11-15 新发行 1 A 2004-06-02 品控部改为品质部 1 染色法、培养基和（微生物检验）试剂配制作业指导书 1目的 对染色法、培养基和试剂配制方法作出明确规定，为检测结果的准确性提供最 基本的保证。 2范围 适用丁微生物检验。 3职责 3.1微检人员负责培养基、试剂配制。 3.2微检人员掌握微生物的染色方法。 4培养基和试剂配制名称、用途 名称 用途 4.1革兰氏染色液 微牛物染色 4.2营养琼脂 细菌培养和细菌总数测定 4.3孟加拉红培养基 霉菌、酵母菌计数 4.4乳糖胆盐发酵管 大肠菌群，粪大肠菌群及人肠杆菌的测定 4.5乳糖发酵管 供大肠菌群证实试验用 4.6三糖铁琼脂 肠杆菌科细菌的生化反应筛选 4.7伊红美兰琼脂 分离肠道致病菌。 4.8缓冲蛋白腺水 沙门氏菌检验屮的前增菌 4.9四硫酸钠煌(TTB)绿增菌液 沙门氏菌检验中的前增菌 4.10 GN增菌液 志贺氏菌的前增菌 4.11亚硒酸盐胱氨酸增菌液 沙门氏菌选择性增菌培养 4.12 SS琼脂 沙门氏菌、志贺氏菌的分离 4.13 V-P半固体琼脂 细菌检验的V?P试验  4.14 7.5%氯化钠肉汤 金黄色葡萄球菌的增菌培养 4.15 Baird-Parker 培养基 金黄色葡萄球菌的检验 4.16酸性肉汤 酸性罐头食品商业无菌检验 4.17尿索琼脂基础 细菌检验中的尿索酶试验 4.18赖氨酸脱竣酶培养基 细菌检验中的赖氨酸脱竣酶试验 4.19 口引味培养基 细菌靛基质试验，亦称色氨酸肉汤 4.20硝酸盐氧化钾培养基 细菌检验中的硝酸盐还原试验和氧化钾试验 4.21生理盐水 检样的溶解与稀释 5具体内容 5.1革兰氏染色法 5.1.1革兰氏染色液 5.1.1.1结晶紫染色液 成份：结晶紫 l.Og 95%乙醇 20.0ml 1%草酸鞍水溶液 80.0ml 5.1.1.2革兰氏碘液 成份：碘 l.Og 碘化钾 2.0g 蒸憾水 300.0ml 5.1.1.3 95%乙醇 5.1.1.4沙黄复染液 成份：沙黄 0.25g 95%乙醇 10.0ml 蒸憾水 90.0ml 5.1.2染色法 5.1.2.1将涂片在火焰上固定。 5.1.2.2初染：滴加结品紫染色液，染lmin,水洗。 5.1.2.3媒染：滴加革兰氏碘液，作用1 min,水洗。 5.1.2.4脱色：滴加95%乙醇脱色，水洗；或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再 用乙醇滴满整个涂片，脱色10s,水洗。 5.1.2.5复染：滴加沙黄复染液，染lmin,水洗，待干，镜检。 5.1.2.6结果判定：革工氏阳性菌呈紫色；革工氏阴性菌呈红色。 一般培养基和专用培养基 5.2.1营养琼脂 521」用途：用于一般细菌培养及细菌总数测定。 5.222 成份(g/L)： 蛋白月东 10.0 牛肉粉 3.0 氯化钠 5.0 琼脂 15.0 PH7.3±0.1 5.2.2.3制法：称取各成份溶于纯水中，加热煮沸至完全溶解，分装，121°C15 min 高压灭菌备用。 522.4注意事项：密封保存于阴凉干燥处。 5.2.2孟加拉红培养基 522.1用途：用于粮食、食品、饮料中霉菌、酵母菌计数。 成份(g/L)： 蛋白月东 5.0 葡萄糖 10.0 磷酸二氢钾 1.0 硫酸镁 0.5 孟加拉红 0.03 氯霉菌 0」 琼脂 15.0 5.2.2.3制法：称取各成份溶于纯水中，加热煮沸至完全溶解，分装，121°C20 min 高压灭菌备用。 522.4注意事项：保存于阴凉干燥处；密封、避光。 5.2.3乳糖胆盐发酵管 523.1用途：用于大肠菌群，粪大肠菌群及大肠杆菌的测定。 成份(g/L)： 蛋白月东 20.0 胆盐 3.0 乳糖 5.0 混甲酚紫 0.01 PH7.4±0.1 523.3制法：称取各成份溶于纯水中，加热煮沸至完全溶解，分装于有倒立发酵管 的试管中，115°C15min高压灭菌，双料乳糖胆盐发酵管除纯水外，其它成份加倍。 523.4注意事项：密封保存于阴凉干燥处。 5.2.4乳糖复发酵管 524.1用途：供大肠菌群证实试验用。 成份(g/L)： TOC \o 1-5 \h \z 蛋白月东 20.0 乳糖 10.0 漠甲酚紫 0.01 PH7?4±0.1 5.2.4.3制法：称取各成份溶于纯水中，加热煮沸至完全溶解，分装10ml于有倒立 发酵管的试管中，115°C15min高压灭菌备用。 524.4注意事项：密封保存于阴凉干燥处。 5.2.5三糖铁琼脂 5.2.5.1用途：主要用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选。 525.2 成份(g/L)： 蛋白月东 20.0 酚红 0.025 牛肉膏 3.0 氯化钠 5.0 乳糖 10.0 硫酸亚铁^(6H2O) 0.5