2的序列分析及凝菌活性.PDFVIP

文章编号：１６７４５５６６（２０１９）０１００２００９ ＤＯＩ：１０．１２０２４／ｊｓｏｕ．２０１８０４０２２７８ 缢蛏Ｃ型凝集素基因ＳｃＣＴＬ２的序列分析及凝菌活性 蓝天一，牛东红，刘晓军，彭茂潇，李家乐 （上海海洋大学 省部共建水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室，上海　２０１３０６） 摘　要：为研究缢蛏Ｃ型凝集素基因ＳｃＣＴＬ２的结构和功能特点，克隆了该基因的全长序列，并对其 ｍＲＮＡ 的表达模式以及重组蛋白的凝菌活性进行研究。结果显示，ＳｃＣＴＬ２的ｃＤＮＡ全长２１９４ｂｐ，共编码６３０个氨 基酸，其氨基酸序列拥有４个Ｃ型凝集素糖识别结构域和１个Ｎ端跨膜区，这一特殊的序列结构不同于任何 一种已知的Ｃ型凝集素。基因ｍＲＮＡ在健康缢蛏肝胰腺中的表达量显著高于其他组织，在鳃中的表达量次 之，而在其余组织中的表达量没有显著性差异；金黄色葡萄球菌与鳗弧菌感染能够显著上调ＳｃＣＴＬ２在缢蛏 ２＋ 血细胞中的表达。ＳｃＣＴＬ２的重组蛋白凝菌实验显示：在Ｃａ 存在的情况下，ｒＳｃＣＴＬ２能够对实验所采用的 金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、藤黄微球菌和酿酒酵母均产生明显的凝集反应；当溶液中不存在 ２＋ ２＋ Ｃａ 时，凝集反应几乎不能发生，意味着ｒＳｃＣＴＬ２的凝菌活性是严格 Ｃａ 依赖的。研究表明，ＳｃＣＴＬ２可能 是一种新的无脊椎动物Ｃ型凝集素类型，它具有无脊椎动物Ｃ型凝集素普遍具备的免疫活性，可能在缢蛏的 免疫中具有重要作用。 关键词：缢蛏；Ｃ型凝集素；凝菌 中图分类号：Ｓ１９７　　　文献标志码：Ａ ［３５］ 　　无脊椎动物体内缺乏获得性免疫机制，主要 物。脊椎动物的Ｃ型凝集素被分为１７类 ，它 凭借固有免疫产生免疫应答，来维持机体的健康 ２＋ 们通过Ｃ型凝集素特有的Ｃａ 依赖的糖识别结 以及正常的生命活动。在无脊椎动物的固有免 构域，也被称作 Ｃ型凝集素结构域（Ｃｔｙｐｅｌｅｃｔｉｎ 疫中，一类由宿主本身的胚系基因编码的蛋白， ｄｏｍａｉｎ，ＣＴＬＤ），广泛参与脊椎动物的免疫识别、 即模式识别受体 （ｐａｔｔｅｒｎｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎｒｅｃｅｐｔｏｒ， 细胞黏附、糖蛋白清除等生命活动。胶原凝素 ＰＲＲ），通过与微生物的一类被称为病原相关分 ［６］ （Ｃｏｌｌｅｃｔｉｎｓ） 、巨噬细胞甘露糖受体（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ 子模式 （ｐａｔｈｏｇｅｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｍｏｌｅｃｕｌａｒｐａｔｔｅｒｎ， ［７］ ［８］ ｍａｎｎｏｓｅｒｅｃｅｐｔｏｒｓ） 、选择素（ｓｅｌｅｃｔｉｎｓ） 以及 ＰＡＭＰ）的保守型分子结合，来识别自然界中种类 ［９］ 自然杀伤细胞受体（ＮＫｃｅｌｌｒｅｃｅｐｔｏｒｓ） 等４类 ［１］ 繁多的病原物质 。由于病原生物表面具有种 Ｃ型凝集素主要参与脊椎动物的免疫反应，其中 类繁多且分布广泛的糖类抗原，糖识别被认为是 胶原凝素和巨噬细胞甘露糖受体参与脊椎动物 无脊椎动物最常见、最有效的识别“异己”方 的固有免疫———胶原凝素能够通过补体途径清 ［２］ ［１０］