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5注意事项目的要求掌握溶剂萃取法提取微生物药物的原理和方法掌握.ppt
复习思考 试述萃取分离技术的种类及其原理。 影响有机溶剂萃取的因素有哪些? 举例说明超临界流体萃取技术在工业中的应用? 举例说明双水相萃取技术生物工业中有何应用? 液-固浸取技术的操作有何特点? 实验二 溶剂萃取法提取与 精制红霉素 目的要求 原理 材料用具 6ml乙酸丁酯 红霉素软膏2g 调PH7.2 ~8.0 抽滤 澄清溶液 乙酸丁酯 乙酸丁酯 酸化PH为3.5~6.0 萃取 收集下相液+饱和食盐水 两次 两次 乙醇-醋酸钾 异丙醇 萃取 上层液 过滤 粗品 清洗干燥 精制品 静置30min 思考 题 实验三 牛血清白蛋白在双水相萃取系统中的分配 目的要求 原理 原理 材料用具 1、配制牛血清白蛋白溶液:浓度1 g/L。 2、配制高浓度的聚合物和盐的母液:PEG6000浓度为400 g/L、硫酸铵400 g/L各20ml。 3、按预先设计好的总组成,由母液配制相应的高聚物子液(60g/L、100g/L、140 g/L)和盐的子液(140 g/L、140 g/L、140 g/L)各4ml。 4、将配制好的高聚物和盐的子液转移至10ml离心管中,再加入牛血清白蛋白溶液2ml,共三组。离心管封口后,反复倒置5~10min,每min 6~10次,使溶液充分混合 5、在1500r/min下离心3~5 min后,观察成相情况。并记录。 6、小心地将目标物用吸管吸出,加入双缩脲试剂进行定性鉴别。 思考 题 双缩脲反应是指蛋白质在碱性溶液中与二价铜离 子结合,生成紫红色络合物的反应。双缩脲是由 两分子尿素缩合而成的化合物,在碱性溶液中与 硫酸铜反应生成紫红色络合物。含有两个或两个 以上肽键的化合物都具有双缩脲反应。蛋白质含 有多个肽键,因此有双缩脲反应,其颜色的深浅 与蛋白质的含量成正比。可利用此反应对蛋白质 进行定性鉴别。 牛血清白蛋白 PEG6000、硫酸铵、硫酸铜、酒石酸钠钾、氢氧化钠、 蒸馏水、双缩脲试剂 双缩脲试剂其的制备如下: 溶解0.15g硫酸铜和0.6g酒石酸钠钾于50ml蒸 馏水中,在搅拌下加入30ml 10%氢氧化钠溶液, 用水稀释到100ml,备用。 操作方法 1、双水相萃取蛋白质的优点是什么? 2、影响双水相成相的因素有哪些? 概念 超临界流体(SCF)是指在临界温度(Tc)和临界压力(Pv)以上的流体。高于临界温度和临界压力而接近临界点的状态称为超临界状态。 种类 二氧化碳 一氧化亚氮 甲醇 乙烷 氨和水 压力 温度 流体密度 容积比 颗粒度 夹带剂 萃取剂的溶解能力易于通过调节温度和压力控制; 可在低温和无氧下操作,不破坏提取物中的活性组分,较适于热敏性 物 质的萃取; 可较快地达到平衡,萃取速率快,生产周期短; 溶剂可回收且简单方便,无溶剂残留; 萃取剂可重新使用,不产生三废,不污染环境。 超临界CO2萃取柑橘香精油的设备流程示意图 1.CO2储罐 2.高压泵 3.萃取釜 4,5,6.阀门 7,8,9.分离釜 10.回流阀 定义 利
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