玻璃体腔注射bevacizumab在早期糖尿病视网膜病变大鼠模型治疗中的实验分析临床医学;眼科学专业论文.docxVIP

天津医科人学硕十学何论文中文摘要 天津医科人学硕十学何论文 中文摘要 目的 通过观察早期糖尿病视网膜病变(DR)大鼠玻璃体腔注射Bevacizumab后 血视网膜屏障(BRB)功能、视网膜血管形态的变化，研究玻璃体腔注射 Bevacizumab应用于早期DR后延缓DR进展的有效性，明确Bevacizumab的剂 量及合适重复给药时间，探讨预防性使用的可行性。 方法 l糖尿病(DM)大鼠模型制造：正常清洁级雄性SD大鼠80只，随即抽取 13只作为正常对照组(N组)，余67只尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)45 me,／kg 诱导糖尿病(DM)大鼠模型。于给药后一周剪尾采血测空腹血糖．若血糖水平1 6． 65 mmol／L，表明DM大鼠模型建立成功。模型建立后观察l周，然后开始计算 DM病程。观察各组大鼠的形态改变，每4周检测1次空腹血糖及体质量。 2 DM大鼠患有早期DR验证：成模后10周，抽取DM大鼠及正常大鼠各2 只进行视网膜铺片，比较观察正常大鼠和DM大鼠微血管形态变化，确定DM 大鼠已患有早期DR。 3玻璃体腔注射Bevacizumab：在确定DM大鼠己患有DR后，DM大鼠随机 分为糖尿病对照组(DR组)、大剂量治疗组(H组)及d,N量治疗组(L组)，L 组及H组分别给予浓度为1．25mg／ml及2．5mg／ml的Bevacizumab4 la l玻璃体腔 注射，均注射一次，N组及DR组未接受任何治疗。 4治疗效果观察：干预治疗后2周、4周及8周，进行免疫组织化学检测分析 血管内皮生长因子(VEGF)表达的变化，用伊文思蓝(EB)法定量检测BRB 破坏程度，用EB灌注视网膜铺片法观察视网膜血管形态的变化，研究玻璃体腔 注射Bevacizumab延缓DR进展的作用。采用SPSS 1 7．0软件包进行统计学处理， 采用单因素方差分析分析数据，P值O．05认为差异有统计学意义。 结果 1 DM大鼠模型制造：实验组大鼠一次成模65只，未成模的大鼠用于正常对 照组，成模率为97％。 2 DM大鼠患有早期DR验证：成模后10周，视网膜铺片示：正常大鼠视 网膜血管走行大致正常，血管密度均匀，毛细血管管径粗细～致，未见迂曲扩 张及微血管瘤等病理变化，未见染料渗漏；DM大鼠视网膜血管变密，血管走行 天津医科人学硕+学位论文迂曲，可见静脉串珠样改变，偶见小血管渗漏染料。DM大鼠已发生早期视网膜 天津医科人学硕+学位论文 迂曲，可见静脉串珠样改变，偶见小血管渗漏染料。DM大鼠已发生早期视网膜 病变。 3本实验中共50只DM大鼠接受玻璃体腔注射Bevacizumab治疗，其中2 只由于技术操作问题，出现玻璃体积血，至实验结束，未发现眼内炎的患鼠， 玻璃体腔注射Bevacizumab的大鼠随着注射时问的延长，均出现白内障。 4治疗效果：干预治疗后，免疫组化显示：各组大鼠视网膜内VEGF各层均 有表达，干预治疗组VEGF表达强于N组而弱于DR组。干预治疗后2周，N 组、DR组、L组及H组EB渗漏量差异有统计学意义(P-o．000)，L组及H组 之间差异无统计学意义(P=0．364)；干预治疗后4周，N组、DR组、L组及H 组EB渗漏量差异有统计学意义(P=0．000)，L组及H组之间差异有统计学意义 (P=0．035)；干预治疗后8周，N组、DR组、L组及H组EB渗漏量差异有统 计学意义(P=0．000)，L组及H组之间差异有统计学意义(P=O．031)。视网膜铺 片示：DR组：给药后2周，视网膜血管明显变密，血管走行明显迂曲，可见视 网膜大血管分支渗漏染料，可见微血管瘤，未见新生血管；给药后4周及8周， 视网膜血管迂曲扩张，管径粗细不均，某些部位管腔狭窄甚至闭塞，走行紊乱， 周边视网膜小血管大片染料渗漏，可见微血管瘤、无灌注区。各干预组视网膜 血管的密度较N组明显增高．较DR组明显减轻，视网膜血管迂曲不明显．未 见染料渗漏，未见微血管瘤及无灌注区。L组偶见小血管渗漏。 结论 (1)检测DR大鼠视网膜内EB含量，可以比较精确地发现大鼠视网膜BRB 的改变，是评价DR大鼠BRB功能的有效方法。 (2)给予早期DR大鼠玻璃体腔注射Bevacizumab可以部分修复受损的 BRB，延缓视网膜微血管病变的进展，在不引起视网膜毒性损伤的情况下，玻璃 体腔注入适量的Bevacizumab有延缓DR进展的作用，2．5mg／0．1ml的远期效果 可能优于1．25m∥0．Iml。 (3)玻璃体腔注射Bevacizumab修复DR大鼠BRB及延缓视网膜微血管病 变进展的作用与剂量有关，且注射后至少8周内效果稳定，本实验认为 Bevacizumab重复给药的时间可以延长至给药后8周。 关键词早期糖尿病视网膜病变 Bevacizumab／玻璃体腔注射血视网膜屏障 糖尿病大鼠