实验二_检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质学案.doc

检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质实验报告 姓名 ： 班级： 【实验目的】 1、尝试检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质，探讨细胞中主要化合物的种类。 2、掌握实验的操作技能。? 3、认识到脂肪、糖类、蛋白质和淀粉是生物组织的重要成分。 【实验原理】 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色也可以被苏丹Ⅳ染液染成红色。糖类中的还原性糖（如葡萄糖、果糖）可以与斐林试剂发生作用，产生砖红色沉淀。蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。淀粉遇碘变蓝色。因此，可以根据与某些化学试剂所产生的颜色反应，检测生物组织中糖类、脂肪或蛋白质的存在。 【材料器具】 1.实验材料：苹果或梨匀浆，马铃薯匀浆，花生种子，花生种子匀浆，豆浆。 2.仪器：解剖刀，试管（最好用刻度试管），试管架，试管夹，滴管，大小烧杯，量筒，酒精灯，三脚架，石棉网，火柴，载玻片，盖玻片，毛笔，吸水纸，显微镜。? 3.试剂：斐林试剂（甲夜：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液，乙夜：质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液）苏丹III或苏丹Ⅳ染液，双缩脲试剂（A夜：质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液，B夜：质量浓度为0.01g/ml的CuSO4溶液），体积分数为50％的酒精溶液，蒸馏水，碘液。 【实验注意问题】 一定要听从老师的安排，不让动的坚决不动。 保持安静，坚决不能大声喧哗。 注意实验安全 注意爱护实验器材，谁损坏谁负责。 【实验过程】 （一）可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别配制、储存， 实验前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂；切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70～900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu ( OH ) 2生成。 4. 试管放在盛有50～650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → （沉淀） 最好用试管夹夹住试管上部，使试管底部不触及烧杯底部，试管口不朝向实验者。 也可用酒精灯水浴加热。 防止试管内的溶液冲出试管，造成烫伤； 缩短实验时间。 （二）脂肪的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。 干种子要浸泡3～4小时，新花生的浸泡时间则可缩短。 因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 在子叶薄片上滴2～3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。 染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，再用吸水纸吸去酒精。 酒精用于洗去浮色，若不洗去，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1～2滴蒸馏水，盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片最薄处，可看到细胞中有染 成 或 圆形小颗粒。 装片不宜久放。 时间一长，油滴会溶解在乙醇中。 （三）蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 鉴定。加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A液1ml，摇匀；再加入双缩脲试剂B液3～4滴，摇匀，溶液变 。 A液和B液也要分开配制，储存。 CuSO4溶液不能多加。 先加NaOH溶液，为Cu2+与蛋白质反应提供一个碱性的环境。A、B液混装或同时加入，会导致Cu2+变成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。 否则CuSO4的蓝色会遮盖反应的真实颜色。 可用蛋清代替豆浆。 蛋清要先稀释。 如果稀释不够，在实验中蛋清粘在试管壁，与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底，并且试管也不易洗干净。 附：淀粉的检测和观察:用试管取2ml待测组织样液，向试管内加2滴碘液，观察颜色变化。 碘液不要滴太多 以免影响颜色观察 【实验结论】实验结果和分析： 生物组织样液 化学试剂 特定颜色反应 证明某种化合