基因突变与原核生物的质粒课件.pptVIP

学生自学阅读有关基因涵义的变迁方面的内容。 基因：在生物体内一切具有自主复制能力的遗传功能单位都可称为基因。 基因的物质基础：一个具有特定核苷酸顺序的核酸片段，一般1000bp，分子量约为6.7×105Dalton。 基因突变简称突变，是变异的一种，指生物体内遗传物质的分子结构突然发生的可遗传的变化。 突变的几率一般在10–6 ~10–9范围内。 根据微生物表型变化将突变分为： 细胞形态 形态突变型 菌落形态 营养缺陷型 生化突变型 抗性突变 抗原性突变（包括细胞内部、表面成分的改变） 致死性突变型：（合成关键性酶的基因发生了突变，则表现 出致死突变） 条件致死突变型：如突变为温度敏感型（37℃死， 25℃活） 其它突变型：毒力突变、糖发酵突变、产量、产品突变等 根据微生物表型变化将突变分为： 按是否能用选择性培养基鉴别来划分：选择性突变株（selective mutant）和非选择性突变株（non-selective mutant） 细胞形态 形态突变型 菌落形态 营养缺陷型 生化突变型 抗性突变 抗原性突变（包括细胞内部、表面成分的改变） 致死性突变型：（合成关键性酶的基因发生了突变，则表现 出致死突变） 条件致死突变型：如突变为温度敏感型（37℃死， 25℃活） 其它突变型：毒力突变、糖发酵突变、产量、产品突变等 突变株的表型 成因 检出方法 营养缺陷型 因突变而丧失合成一 补充培养基 （auxotroph） 种或几种生长因子的 能力不能在基本培养 基上生长 选择性 抗性突变型 因突变而产生了对某 药物培养基 突变株 (resistant mutant) 种化学药物或致死物 理因子的抗性 条件致死突变型 突变后在某种条件下 培养条件改变 （conditional 可正常生长、繁殖并 lethal mutant） 实现其表型，而在另 一条件下却无法生长 繁殖的突变型 ★ 形态突变型 因突变而产生的个体 形态 morphologycal 或菌落形态的非选择 mutant 性变异 非选择性 抗原突变型 因突变而引起的抗原 无 突变株 antigenic 结构发生改变 mutant 产量突变型 因突变而获得的在有 无 high producing 用代谢物产量上高于 mutant 原始菌株的突变株 其它突变型：毒力、糖发酵能力、代谢产物、依赖性 原核生物的质粒 定义：是一类小型闭合环状核外双螺旋DNA分子，能独立于细胞核进行自主复制。 大小：约为2~100×106Dalton，上面携带有数个到数十个甚至上百个基因。 性质： ①可以在细胞质中独立于染色体之外独立存在（游离态），也可以通过交换掺入染色体上，以附加体（episome）的形式存在； ②质粒是一种复制子（replicon），根据自我复制能力的不同，可把质粒复制的控制形式分为严紧型和松弛型两种，严紧型质粒的复制受细胞核控制，与染色体DNA复制相伴随,一般一个寄主细胞内只有少数几个（1~5）个拷贝；松弛型质粒的复制不受细胞核控制，在染色体DNA复制停止的情况下仍可以进行复制，在细胞内的数量可以达到10~200个或更多。 ③可以通过转化、转导或接合作用而由一个细菌细胞转移到另一个菌细胞中，使两个细胞都成为带有质粒的细胞；质粒转移时，它可以单独转移，也可以携带着染色体（片段）一起进行转移，所以它可成为基因工程的载体。 ④对于细菌的生存并不是必要的 ⑤功能多样化 原核生物的质粒 功能：进行细胞间接合，并带有一些基因，如产生毒素、抗药性、固氮、产生酶类、降解功能等。 重组：在质粒之间、质粒与染色体之间菌可发生。 存在范围：很多细菌如E.coli、Shigella（志贺氏菌）、S.aureus（金黄色葡萄球菌）、Streptococcus lactis（乳链球菌）、根癌土壤杆菌等 制备：包括增殖、裂解细胞、分离质粒与染色体和蛋白质等成分、去除RNA和蛋白质等步骤。 鉴定：电镜观察、电泳、密度梯度离心、限制性