生物制药工艺学 13章..ppt

细胞碎片分布在下相的好处 （1）核酸等大部分杂质一般处于下相，可以同时除去。 （2）下相是无机盐富集相，作为废物扔掉，费用相应低一些。 （3）将蛋白质产物分配在上相有利于保持其活性（PEG保护作用），而下相的高盐浓度会造成产物的失活或沉淀。 （4）碎片在下相有利于连续式离心机分离，若在上相容易堵塞离心机出口。 * 第四节 双水相萃取技术的应用 一、双水相萃取的工艺流程 第五节 双水相萃取技术的发展 Wenzhou Medical University 生物制药工艺学 王晓杰 博士 温州医科大学 第十三章 双水相萃取技术 第一节 双水相萃取概述 β―半乳糖苷酶不同纯化方法的比较 不同方法除去细胞碎片的比较 注：(a)酶滞留比R=0；(b)酶滞留比0.7 双水相萃取的技术特征： 双水相的形成： 几种典型的双水相系统 备注 选择依据 A 聚丙二醇 聚乙二醇 聚乙烯醇 葡聚糖（Dex） 羟丙基葡聚糖 两种非离子型聚合物 双水相系统的选择原则： 必须有利于目的物的萃取和分离，同时又要兼顾到聚合物的物理性质。 聚乙二醇（PEG） 聚乙烯醇 葡聚糖（Dex） 甲基纤维素 B 硫酸葡聚糖钠盐 羧基甲基葡聚糖钠盐 聚丙烯乙二醇 甲基纤维素 其中一种为带电荷的聚电解质 C 羧甲基葡聚糖钠盐 羧甲基纤维素钠盐 两种都为聚点解质 D 聚乙二醇 磷酸钾 硫酸铵 硫酸钠 硫酸镁 酒石酸钠 一种为聚合物，一种为盐类 C点为系统临界点。 = VT VB BM MT 二、相图： 三、物质在两相中的分配 K = CT CB 第三节 影响双水相萃取的因素 ln K = －△E/k T Ln K = Mr λ/kT 1、表面自由能的影响 2、表面电荷的影响 当KAZ＋ ≠ KBZ-时，U2 - U1 ≠ 0 3、综合考虑 -lgK = A△γ + δ△φ + β 4、影响分配平衡的参数 Dex水解程度不同，对蛋白质的分配系数也有一定的影响 (2) 体系中无机盐离子的影响 （4）体系温度的影响 （5）体系中微生物的影响 Wenzhou Medical University *