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外来化合物对细胞生理代谢的影响一急性Znc 12染毒对小麦幼苗SOD活力影响 学院： 专业： 年级：级 姓名： 学号： 指导老师： 外来化合物对细胞生理代谢的影响一急性Znc 12染毒对小麦幼苗SOD活力影响 生命科学学院级专业 姓名： 学号： 指导教师： 摘要：本实验以小麦幼苗为实验对象，从毒性的氧化损伤出发，测定染不同浓度的Zncl2 （浓度依次为 100mg/L. 200mg/L. 400mg/L. 800mg/L和1600mg/L）后小麦幼苗茎叶组织中的SOD的活性变化，来讨论 ZnCL对小麦幼苗茎叶组织SOD酶活性的影响，为研究细胞分子水平毒性机制提供科学依据。Znc 12浓度为 100mg/L与Zncl2浓度400mg/L. 800mg/L及1600mg/L相比,SOD酶活的差异极显著,说明Zncl2浓度为 100mg/L与其他三个浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响差异极大。当Znc 12浓度分别为100mg/L. 200mg/L时, 与对照组相比，SOD酶活的差异显著，说明该浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响明显。当Znc 12浓度分别为 400mg/L,800mg/L时，SOD酶活的差异不显著，说明该浓度对小麦幼苗SOD酶活的影响不明显。本实验说明 不同浓度的Zncl2对小麦幼苗SOD酶的活性的影响不同。且对ZncL影响SOD酶的活性的机制进行了简单分 析。 关键词：外来化合物细胞生理代谢影响急性Znc 12染毒小麦幼苗SOD活力 超氧化物歧化酶Orgotein （Superoxide Dismutase, SOD）,另!j名肝蛋白、奥谷蛋白， 简称：SODo SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有 害物质，对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。它广泛存在于生物体的各种组织中, 能清除白由基。2 （超氧阴离子自由基），而02具有细胞毒性，可使脂质过氧化，损伤细胞膜, 引起炎症，肿瘤和自身免疫性疾病，并可能促使机体衰老。 在生态系统中，Zn是生物的多种生命代谢活动的重要参与者，生物对Zn的需求大体保 持着动态平衡，但当Zn的浓度超出生态系统所能承受的容量或“弹性限度”时，整个生态 系统的生物生产量就会受到影响，并直接或问接地危害人类的生命和健康。Zn的不足和过 量均会使动植物出现生理代谢紊乱。植物Zn含量超过50 mg/kg时往往会发生Zn中毒，大 量Zn在根部积累，使根系吸收K受到抑制，从而造成生长不良，其至死亡。 1实验材料与方法 1.1实验材料 小麦幼苗 0. 05niol/L pH7.0 PBS缓冲液 SOD试剂盒 冰醋酸 6个不同浓度Zncl2 溶液（Omg/L, 100mg/L, 200mg/L, 400mg/L, 800mg/L, 1600mg/L） 1. 2实验仪器 冷冻离心机 分光光度计 分析天平 恒温水浴锅 冰浴 微量移液器（50uL, 100PL） 研体离心管一次性塑料管 纱布 粗滤纸 1. 3试验方法 1.3. 1 Zncl2染毒处理实验及粗酶提取液的制备 小麦浸种5?6h,萌发24?36h后将露白的种子随机摆放于培养皿中，40?50粒/皿左右，生 长5天后，分别用不同浓度的ZncL溶液处理8天后，在同一皿中随机取茎叶0.3?0.5g （每 一处理浓度中有4皿即4个重复），按1:10加入预冷的PBS液（1/2用于研磨，1/2用于清 洗，小范围研磨，便于冲洗）剪碎，冰浴研磨，倒入离心管并用剩余的PBS液冲洗入离心管, 混匀后8000rpm离心15min,上清液即为10%的粗酶提取液，适当稀释后用于SOD酶活性的测 定。 1.3.2总SOD酶活测定 总SOD酶活测定按表进行 试剂 测定管（4个） 对照管 SOD试剂1 1ml 1ml 2. 5%粗酶提取液 40 uL 蒸憾水 40 uL SOD试剂2 0. 1ml 0. 1ml SOD试剂3 0. 1ml 0. 1ml SOD试剂4 0. 1ml 0. 1ml 充分摇匀，置于37°C冰浴40min 显色剂 2ml 2m 1 混匀.胃率温10min,于波长550nm处，1cm光径比色环，蒸憾水调零, 比色，测定各管0D值 说明：通过实验探索可知粗酶提取液量为40uL时最适宜。 总SOD活力（U/P 总SOD活力（U/P二 对照管0D-测定管0D对照管0D -50%x 反应应液总体 X样吊测试前的稀释倍数 2结果与分析 2.1不同浓度Zncb溶液处理小麦茎叶总SOD酶活性 Zncl2浓度 (mg/L) 各重复的总SOD酶活力 总SOD平均值土标准差 1 2 3 4 0 （对照） 1310.63 930.13 1183.80 887.85 1078. 1025±202. 7584 100 1138. 07 1286