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第一部分---从头合成质粒
单片段克隆
多片段克隆
第二部分---已有质粒改造
突变
缺失
插入;从头合成质粒
之
单片段克隆;用含有质粒同源序列的引物做PCR扩增出含质粒同源序列的目的基因片段;AAA…;5’;PCR反应体系(Takara PrimeSTAR);同源反应体系(标准版);从头合成质粒
之
多片段克隆;用包含同源序列的引物做PCR扩增出含同源序列的片段1;3’;5’;PCR反应体系(Takara PrimeSTAR);同源反应体系(标准版);已有质粒改造
之
突变;以质粒为模版用包含同源序列的引物做PCR,扩增得到线性质粒;;;PCR反应体系(Takara PrimeSTAR);同源反应体系(标准版);已有质粒改造
之
缺失片段;以质粒为模版用包含同源序列的引物做PCR,扩增得到线性质粒;;;PCR反应体系(Takara PrimeSTAR);同源反应体系(标准版);已有质粒改造
之
插入片段;以质粒为模版用包含同源序列的引物做PCR,扩增得到线性质粒;;;PCR反应体系(Takara PrimeSTAR);同源反应体系(标准版);附:其他引物设计方法质粒PCR原理图(不推荐);;;
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