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HRP 免疫组织化学试剂盒 （兔） Horseradish Peroxidase Immunohistochemistry Kit (Rabbit) 品编号：E670016 包装规格：100 Tests/500 Tests/ 1000 Tests 品简介 HRP 免疫组织化学试剂盒系列用于细胞或组织切片的免疫组织化学染色。本试剂盒的检测原理为，HRP 标记的IgG (H+L) 与组织切片上的一抗结合，再加入DAB 显色液，HRP 可以催化DAB 显色液中的H O 分解，使联苯胺氧化变成联苯亚胺， 2 2 在组织切片的一抗结合的抗原位点上出现黄色或棕黄色着色。本试剂盒适用于石蜡切片、冰冻切片和细胞涂片。 品特点 h 1. 由于本试剂盒不再使用生物素，从而可以避免可能由生物素引起的非特异性背景显色，使得显色背景更清晰，阳性结果 c 更特异。 2. 本试剂盒操作简便，适用于进行大批量切片免疫组织化学染色。 e t 保存条件 o HRP标记的山羊抗兔IgG -20 C保存，其它试剂2-8 C保存，保质期12个月。 i 试剂盒组成 B 组分 100 Tests 500 Tests 1000 Tests 试剂 A 内源性过氧化物酶阻断剂 (Endogenous Peroxidase 10 mL 50 mL 100 mL Blocking Solution) n 试剂 B 封闭液 (Blocking Solution) o 10 mL 50 mL 100 mL 试剂 C HRP标记的山羊抗兔IgG (HRP Conjugated Goat 25 μL 125 μL 250 μL Anti-Rabbit IgG) g 试剂 D1 DAB缓冲液 (20×) (DAB Buffer (20×)) 0.5 mL 2.5 mL 5 mL 试剂 D2 DAB底物 (20×) (DAB Substrate (20×)) 0.5 mL 2.5 mL 5 mL n 试剂 D3 DAB色原 (20×) (DAB Chromogen (20×)) 0.5 mL 2.5 mL 5 mL a 操作步骤 A. 免疫组织化学染色的准备工作 S 1. DAB 显色工 液的配制 按照850 μL 蒸馏水分别加入试剂DAB 缓冲液(20×)、DAB 底物(20×)和DAB 色原(20×)各50 μL 的比例稀释，混匀，即 为DAB 显色工 液。DAB 显色工 液须现用现配。 2. HRP 标记的二抗的稀释 将HRP 标记的二抗按照1:200-2000 的比例用PBST 或含1%BSA 的PBST 稀释。根据阳性结果的强弱，其稀释比例可 以适当地提高或降低。 B. 石蜡切片染色 1. 切片常规脱蜡至水。 2. 对组织进行相应的抗原修复。 3. 滴加100 μL 内源性过氧化物酶阻断剂，室温孵育10-15 min，以阻断内源性过氧化物酶的活性。 4. PBST 冲洗，5 min×3 次。 5. 滴加100 μL 封闭液，室温孵育30-45 min，倾去，不洗。 6. 滴加适当比例稀释的一抗，37