NKG2A阳性NK细胞比率.pptVIP

Q A Thank you! * C57BL/6：一种可患携带人类慢性乙肝病毒的免疫小鼠 BALB/C：对HBV有较强免疫力，HBV无法对其造成永久感染 * * * * * * * * * * 来源于慢性粒细胞白血病病人的细胞系,常作为检测自然杀伤细胞(NK)的51Cr释放试验的靶细胞。 * Experiments Experiment 3-1 Results: HBV组肝内NKG2A阳性NK细胞比率（图A-上）及NK细胞NKG2A表达增加（图A-下）。 HBV组外周血NKG2A阳性NK细胞比率无明显增加（图B-上）；外周血NK细胞NKG2A表达增加（图B-下）； Q: 为什么PBMC中PBS组%NGG2A+NK CELL和NKG2A MFI均较高？？？？？ 注： MNC: mononuclear cell PBS: phosphate-buffered saline MFI: mean fluorescent intensity HBV: hepatitis B virus PBMC: peripheral blood mononuclear cell Experiments Experiment 3-1 Results: 某些慢性乙肝携带小鼠的HBsAg会慢慢转阴，与那些HBsAg仍处于阳性的小鼠相比，其外周血NKG2A表达较低（图C-下）， NKG2A阳性NK细胞比率也较低（图C-上）。这与经抗病毒治疗后，在乙肝患者上观察到的NKG2A表达情况类似。 PBMC NKG2A expression on NK cell: HBsAg+HBsAg- NKG2A+ NK cell frequency : HBsAg+HBsAg- 注： MFI: mean fluorescent intensity HBV: hepatitis B virus PBMC: peripheral blood mononuclear cell Experiments Experiment 3-2 Material: BALB/C 小鼠（对HBV有较强免疫力，HBV无法对其造成永久感染） Method: 同实验3-1 Result: 与PBS相比，HBV组肝内NKG2A+NK细胞不增高反而降低。（如图D-下，注：D-下为注射两周后的数据） Conclusions: BALB/C小鼠对HBV较强的免疫，可能与其低NKG2A 表达有关 Experiments Experiment 3-3 Background: 我们发现，慢性乙肝患者血清不能改变健康者外周血液中NK细胞上NKG2A的表达，却可以抑制NK细胞的细胞毒作用，WHY？？ 猜测1，慢性乙肝患者血清不能影响健康者外周血NK细胞上NKG2A的表达； 猜测2，慢性乙肝患者血清选择性消除NKG2A- NK细胞，并诱导肝内NK细胞NKG2A的表达。为验证猜测，开展实验。 Experiments Experiment 3-3 Materials： C57BL/6小鼠 Method:：用BrdU [ BrdU(溴化脱氧尿嘧啶核苷)可以在体内和体外掺入到处于S期的细胞所合成的DNA链中，以标记DNA。可间接反映细胞增殖情况] 吸收试剂注射慢性乙肝携带小鼠和对照组小鼠。（注射PBS的小鼠为对照组） Experiments Experiment 3-3 Result: 肝内NKG2A+ NK细胞比率增加NKG2A+ 细胞吸收更多BrdU，说明其有明显增殖；未观察到NKG2A- NK, CD4 +T, 和 CD8+ T cell 的明显增殖。(如下图） 肝内NKG2A+ NK细胞被选择性扩增！ Experiments Experiment 3-4 Background: 我们同时也发现，慢性乙肝携带鼠的肝淋巴细胞可诱导Rag1小鼠[C57BL/ 6J 重组活化基因 1(recombinantactive gene 1,Rag1)敲除鼠，缺乏成熟T，B细胞]?NK细胞NKG2A的高表达。 Purpose: 确认诱导NKG2A高表达的淋巴细胞种类。 Methods:使用临床磁性活化细胞分选系统对来自乙肝携带鼠和对照组小鼠的CD4-、CD4+CD25 T-和 CD4+CD25+进行分选，并将其与与纯化的NK细胞共同培养3天，然后测定各组NKG2A 表达情况，并测定各组细胞因子的表达情况。 Experiments Experiment 3-4 Your date here Results: （1）只有来自慢性乙肝携带鼠的CD4+CD25+T细胞诱导了 NK细胞NKG2A的表达 （2） CD4+CD25+T细胞内IL-10表达增加，主