烟草种质资源AFLP分析中DNA模板的制备-亚热带植物科学.PDF

2005,34(2):1-4. Subtropical Plant Science 烟草种质资源 AFLP 分析中 DNA 模板的制备 1 1 2 杨友才 ，周清明 ，尹晗琪 （1.湖南农业大学 农学院，湖南 长沙 410128 ；2. 中山大学 生命科学院，广东 广州 510275 ） 摘 要 : 采用CTAB法和SDS法提取烟草基因组DNA ，经检测表明，CTAB法提取的基因组DNA纯度高于SDS 法；CTAB法提取的DNA ，其OD260/OD280值均高于 1.8，相对分子量 23kb左右，且能完全被EcoR Ⅰ和Mse Ⅰ酶 切消化，并能获得清晰的AFLP指纹图谱。 关键词：烟草；AFLP；DNA 提取方法 中图分类号：Q781 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2005)02-0001-04 Making Template DNA in the Analysis of Tobacco Germplasm Based on AFLP Fingerprint 1 1 2 YANG You-cai , ZHOU Qing-ming , YIN Han-qi (1.College of Agronomy, Hunan Agricultural University, Changsha 410128, Hunan China; 2.College of Life Science, Zhongshan University, Guangzhou 510275, Guangdong China) Abstract: Two methods—CTAB method and SDS method were tested in isolation of tobacco genomic DNA. The results showed that the degree of purity of DNA extracted by using CTAB method was higher than that by using SDS method; the value of OD260/OD280 for the DNA samples obtained with CTAB method was over 1.8; the molecular weight of DNAs was more than 23kb, the DNAs were completely digestible with EcoR Ⅰ/Mse Ⅰ, and the AFLP figure were obtained. Key words: tobacco; AFLP; DNA extraction 扩增片段长度多态性 （Amplified fragment length polymorphism ，AFLP ）是由Zabeau和Vos发展起来 的新一代分子标记技术[1] ，是一种选择性扩增限制性片段的方法，它既具有RFLP 的可靠性，又具有 RAPD 的方便性，因此，目前已被广泛应用于生物多样性、图谱构建、基因分离、品种鉴定、QTL分析、 杂种优势预测和分子标记辅助选择育种等方面的研究，并在水稻[2,3] [4] [5] [6] [7] 、棉花 、玉米 、小麦 、大麦 、 花生[8]等作物上得到了广泛应用，而对于烟草的AFLP分析尚未见报道。进行