肾活检免疫组织化学法与免疫荧光直接法染色结果对比分析.PDFVIP

2018年第46卷第9期 2018,Vol.46,No.9 航空军医 ·论　　著 · 肾活检免疫组织化学法与免疫荧光直接法染色结果对比分析 张莉鑫 连 平 （湖南省长沙泰和医院检验科 410000） 摘要：目的　探讨免疫荧光直接法染色和免疫组织化学法运用在肾活检中的临床效果。方法　选择 2015 年 10 月 -2016 年 10 月期间我院 收治的 87 例行肾活检患者为研究对象，分别行石蜡切片免疫组化和冷冻切片免疫荧光检查，并且选择荧光免疫检测结果为对照组，对免疫组 结果 化的染色情况进行观察。 　免疫荧光冷冻切片组和免疫组化组的C4c、C3c、C1q、IgM、IgG以及IgA染色结果、表达部位、表达强度均一致， 组间比较无差异（P0.05）。结论　在肾活检中，石蜡切片免疫组化检查可以作为免疫荧光冷冻切片结果不理想的一种补救方法。 关键词：免疫组织化学　免疫荧光　石蜡切片　冷冻切片　肾活检 中图分类号：R692 文献标识码：A 文章编号： 1009-5187（2018）09-060-02 肾小球肾炎是比较常见的一种疾病，以高血压、蛋白尿、水肿以 免抗人荧光素抗体 IgM、IgA、C1q、IgG、Fn、C3c 滴入；③在湿盒内 及血尿等症状为主要表现，其发病机制复杂，可能与免疫、感染、遗 放置切片，在 37° C 温箱中进行 30min 的避光孵育；④运用 PBS 液进 传以及代谢等诸多因素有关 [1]。当前在诊断肾小球肾炎时，检测异常 行 3 次洗涤，将 PBS 去掉后，用缓冲甘油进行封片，并且在荧光显微 免疫复合物沉积是比较有效的一种方法，并且常用的冷冻切片免疫荧 镜下直接观察。 光法具有操作简单、能够保存抗原等优点，但是在肾活检的过程中， 1.3判定结果 有诸多因素影响检测结果。因此，本文对肾活检中运用免疫荧光直接 1.3.1 免疫组化：在光学显微镜下放入石蜡切片，可见 DAB 显色 法染色和免疫组织化学法的临床价值进行了探讨，如下报道。 液在肾小球的间质细胞内、间质血管壁、肾小囊基底膜、系膜区以及 1资料和方法 毛细血管壁处着色，其中棕色为阳性 [2]。 1.1一般资料 1.3.2 免疫荧光：运用荧光显微镜对每张切片的 C4c、C3c、 选择我院 2015 年 10 月 -2016 年 10 月期间收治的行肾活检患者 C1q、IgM、IgG 以及 IgA 荧光抗体沉积部位进行观察，并且将视野内 87 例为研究对象，年龄 30—68 岁，平均（48.6±12.5）岁，其中 37 荧光的强度作为基本依据，进行半定量评分，通常强度可以分为6级： 例为女性、50例为男性，疾病类型：膜性肾病25例、IgA肾病50例、 ①阴性（-）。高倍镜下不见荧光；②（+/--）高倍镜下荧光隐约可 狼疮性肾炎12例。 见；③（+）低倍镜下荧光隐约可见，高倍镜下可见荧光；④（++）。 1.2方法 高倍镜下荧光清晰可见，且低倍镜下可见；⑤（+++）。低倍镜下荧 1.2.1 仪器和试剂：选择 ZIESS 荧光显微镜、Nikon 80I 光学显 光清晰可见，且高倍镜下耀眼；⑥（++++）。高倍镜下荧光刺眼，且 微镜、Leica ASP300S 自动脱水机、Leica RM2245 石蜡切片机以及 低倍镜下耀眼 [3]。 Leica 恒温冷冻切片机。同时，选择上海长岛生物科技有限公司提供 1.4统计学分析 的Fn、C4c、C3c、C1q、IgM、IgG以及IgA；运用DAB显色液、二抗、 运用 SPSS12.5 软件分析数据，运用非参数秩和检验等级资料， PBA缓冲液、封闭液、修复液、PT-Link、OCT包埋剂（DAKO，丹麦）； 以P0.05表示有差异。 伊红、哈氏苏木精等。 2结果 1.2.2 分配标本