荧光分光光度计检定结果的不确定度评定.docx

荧光分光光度计检定结果的不确定度评定张宝华，白月霞，韩江振，郝静坤（河北省计量监督检测院，河北 石家庄 050051）[ 荧光分光光度计检定结果的不确定度评定 张宝华，白月霞，韩江振，郝静坤 （河北省计量监督检测院，河北 石家庄 050051） [ 摘 要] 依据 JJG 537-2006《荧光分光光度计》检定规程对荧光分光光度计进行检定时，检定结果的不确定度主要来源于 仪器的线性误差、检出下限、标准物质定值及溶液配制体积。对各不确定度分量进行了评定和计算，求得标准不确定度和扩展不 确定度分别为 0.005 2、0.01 g/mL。 [ 关键词] 荧光分光光度计；检定结果；不确定度；评定 [ 中图分类号] TH 744.12 [ 文献标识码] B [ 文章编号] 1003-5095(2010）04-0069-05 荧光分光光度计是对于发射荧光的物质进行定 性、定量测量的分析仪器。适用于材料研究、药品分 析、生化及临床检验、水质分析控制、食品安全检测等 领域。本文依据 JJF 1059-1999[1]和 JJF 1135-2005[2] 技术规范对仪器的检定结果进行了不确定度评定，分 析了不确定度的主要影响因素，以保证检测数据的准 确可靠。 1 检定方法 依据 JJG 537-2006《荧光分光光度计》检定规程 进行检定。 1. 1 主要仪器与试剂 荧光分光光度计：F-7000 型，日本日立公司。 荧光标准物质：GBW（E）130110，标准值 98.6%，相 对扩展不确定度为 0.5%,中国计量科学研究院。 1. 2 工作原理 荧光分光光度计由光源氙弧灯发出的光通过切 光器使其变成断续之光以激发单色器变成单色光，此 光即为荧光物质的激发光，被测的荧光物质在激发光 照射下所发出的荧光，经过单色器变成单色荧光后， 照射于测试样品用的光电倍增器上，由其所发生的光 电流经过放大器放大输至记录仪，激发单色器和荧光 单色器的光栅均由电动机带动的凸轮所控制，当测绘 荧光发射光谱时，将激发光单色器的光栅固定在最适 当的激发波长上，所记录的光谱即为发射光谱，简称 荧光光谱。荧光分光光度计是当测绘荧光激发光谱时 将荧光单色器的光栅固定在最适当的荧光波长处，只 让激发光单色器的凸轮转动，将各波长的激发光的强 度讯号输入至记录仪。当用荧光分光光度计进行标准 溶液测量时，将激发光单色器固定在所选择的激发波 长处，将荧光单色器调节到所选择的荧光波长处，由 记录仪得出的信号即是标准溶液的荧光强度。 数学模型 Ai=bxi+a Ai—仪器第 i 点的响应值； a——标准工作曲线的截距； b——标准工作曲线的斜率； xi—按直线方程计算的第 i 点的标准溶液 的浓度。 1. 3 式中 2 测量不确定度的主要来源 荧光分光光度计检定结果的不确定度主要来源 于以下几个方面：（1） 标准物质定值及标准溶液配置 引入的不确定度；（2） 线性误差引入的不确定度；（3） 检出下限引入的不确定度。 3 测量不确定度的评定 3. 1 标准物质定值引入的相对标准不确定度 硫酸奎宁荧光标准物质来自中国计量科学研究 院，其证书所给出的扩展不确定度为 0.5%，k=2，其相 对标准不确定度为: u = 0.5% =0.25% rb 2 3. 2 配制标准溶液引入的相对标准不确定度 测试过程中使用的硫酸奎宁标准系列溶液，在配 制时使用了分度值 0.01 mg 的电子天平，1 000、500、 250 mL 等容量瓶，10 mL 滴定管，5 mL 移液管，1、25 mL 单标线吸管，10 mL 分度吸管，这些玻璃量器的不确 定度分别由它们的校准误差和实际使用温度与校准 温度的不同引起的。 [ 收稿日期] 2010-01-26 [ 作者简介] 张宝华（1963-），男，工程师，主要从事化学计量 工作。 ·70·河 北 化 工第 4 期3. 2. 1 称量引入的相对标准不确定度标准物质的称量为 5 mg，称量天平是分度值0.01 mg 的分析天平，由天平的检定证书得到称量的 扩展不确定度为 0.05 mg，按均匀分布，包含因子 k= 姨 3 ，则称量引入的相对标准不确定度：V500=姨V1 22+V 2=姨0.14 +0.30 =0.33 mL2 2500 mL 容量瓶引入的相对标准不确定度：= 0.33 ×100%=0.066%uv5005003. 2. 4 250 ·70· 河 北 化 工 第 4 期 3. 2. 1 称量引入的相对标准不确定度 标准物质的称量为 5 mg，称量天平是分度值 0.01 mg 的分析天平，由天平的检定证书得到称量的 扩展不确定度为 0.05 mg，按均匀分布，包含因子 k= 姨 3 ，则称量引入的相对标准不确定度： V500