肥胖与非肥胖者腹部皮下及内脏脂肪组织蛋白质组差异的初步研究内科学专业论文.docxVIP

里壁皇斐!!些耋些型鏖!墨堕堕些堕塑堡里塑堕塑茎墨竺塑生堕塑——————一肥胖与非肥胖者腹部皮下及内脏脂肪组织 里壁皇斐!!些耋些型鏖!墨堕堕些堕塑堡里塑堕塑茎墨竺塑生堕塑——————一 肥胖与非肥胖者腹部皮下及内脏脂肪组织 蛋白质组差异的初步研究 摘要 【背景：研究表明内脏脂肪堆积与胰岛素抵抗的发生密切相关，是2型糖尿病、 血脂异常、心血管疾病等的主要危险因素。Brochu等应用高胰岛素正常血糖钳 夹试验的方法对绝经后肥胖妇女的研究发现：胰岛素刺激的葡萄糖利用与内脏脂 肪量呈负相关，而与腹部皮下脂肪量无关。Owens等对肥胖的青少年的研究表明 内脏脂肪量与血清甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白B水 平及血压呈正相关，与血清高密度脂蛋白胆固醇水平呈负相关。Baner]i等对亚 洲印度男性的研究也发现胰岛素刺激的葡萄糖利用与内脏脂肪量呈负相关，而与 总的或腹部皮下脂肪量无关；血清甘油三酯，高密度脂蛋白胆固醇水平也与内脏 脂肪量直接相关，而与皮下脂肪量无关。内脏脂肪堆积与胰岛素抵抗的相关性不 仅存在于肥胖患者中，而且在有内脏脂肪堆积的非肥胖者中也存在。Goodpaster 等的研究则认为腹部皮下脂肪是预示胰岛素敏感性的独立因素：随着腹部皮下脂 肪量的增加，胰岛素敏感性逐渐下降。并且，它与胰岛素敏感性的相关程度至少 相当于，甚至超过内脏脂肪与胰岛素敏感性的相关程度。目前许多研究发现腹部 皮下与内脏脂肪组织合成与分泌的多种生物活性物质的表达水平有差异。这些研 究多采用mRNA差异显示的方法。从转录到翻译后，蛋白质的表达在多个位点 上受到调节。细胞内某种mRNA浓度的差异主要反映相应基因的活性的不同， 并不能真正反映体内蛋白质浓度的差异及蛋白质的翻译后修饰等差异。蛋白质组 学(Proteomics)是近几年国际上继人类基因组学后新兴起的学科，是对基因产 物进行全面分析的有效手段。这种方法可对特定条件下组织或纽胞基因组表达的 所有蛋白质进行质量和数量分析，确定全部蛋白质表达谱。／、 目的：本研究旨在利用蛋白质组学研究的基本手段——二维电泳和质谱分析 体系对肥胖与非肥胖者腹部皮下及内脏脂肪组织蛋白质的表达进行比较，找出差 异蛋白质，以此来分析腹部皮下及内脏脂肪组织可能的功能差异及中心型肥胖中 腹部皮下脂肪组织、内脏脂肪组织分别与胰岛素抵抗的可能关系，探讨胰岛素抵 抗的可能机制。 f方法：研究对象为4例因良性疾病择期行开腹手术者，其中肥胖者2例 (BMI25kg／m2和男性腰围90cm或女性腰围≥80cm)和对照者2例(BMI23kg／m2 和男性腰围90cm或女性腰围80cm)。手术前，对研究对象进行身高、体重、 腰围及臀围的测量和空腹血糖、空腹血胰岛素及血脂的测定。手术中取每例研究 肥胖与非肥胖者腹部皮下及内脏脂肪组织蛋白质组差异的初步研究对象腹部皮下及大网膜脂肪组织各约1克。经样品处理及蛋白质定量后，进行二 肥胖与非肥胖者腹部皮下及内脏脂肪组织蛋白质组差异的初步研究 对象腹部皮下及大网膜脂肪组织各约1克。经样品处理及蛋白质定量后，进行二 维电泳(银染色)，所得凝胶图谱经扫描后用PDQuest软件进行分析，找出腹部 皮下与内脏脂肪组织之间及肥胖与非肥胖者腹部皮下脂肪组织之间、内脏脂肪组 织之间的OD(Optical Density)值相差1倍及1倍以上的点作为差异点。然后取其 中1例研究对象的样品再次进行二维电泳，并以考玛斯亮蓝R250染色。切割考 玛斯亮蓝染色凝胶上的与银染色凝胶上差异点位置相同的点，进行质谱分析。 结果：2例肥胖者的BMI(kg／m2)(30．8，28．6)，腰围(cm)(102，88)，臀围(cm) f102，95)，WHR(1．0，O．93)较2例对照者的BMI(22，21．1)，腰围(75．5，76)，臀围 (90．5，851，WHR(0．83，0．89)高。2例肥胖者空腹胰岛素(“O／m1)(9．0，8．7)较2例 对照者(3．6，3．4)高。2例肥胖者血清甘油-三酉旨(TG)(rnmol／1)(3．7，2．O)较2例对照 者(1．1，1．1)高。空腹血糖(mmol／1)在2例肥胖者分别为5．4，4．7；2例对照者分 别为4．0，4．4。血清总胆固醇(TC)(retool／1)在2例肥胖者分别为4．3，5．7；2例 对照者分别为4．4，5．3。血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL．C)(mmol／1)在2例肥胖 者分别为0．6，0．9；2例对照者分别为1．4，0．9。血清低密度脂蛋白(LDL—c)(mmol／1) 在2例肥胖者分别为2．O，3．9；2例对照者分别为2．5，3．9。1号研究对象(肥 胖者)内脏脂肪组织与腹部皮下脂肪组织的差异点共95个，其中在内脏脂肪组 织中表达较腹部皮下脂肪组织高的点76