发酵设备--发酵罐一些操作.pptVIP

第 二 章 发 酵 设备 超净工作台 超净台是80年代开始问世的一种防止污染的装置。其主要功能是利用空气层流装置排除工作台面上部包括微生物在内的各种微小尘埃。 通过电动装置使空气通过高效过滤器具后进入工作台面，使台面始终保持在流动无菌空气控制之下。而且在接近外部的一方有一道高速流动的气帘防止外部带菌空气进入。 操作人员的穿着 设备主要部件包括： 罐身 电机 搅拌器 轴封 消泡器 联轴器 中间轴承 空气吹泡管（或空气喷射器） 挡板 冷却装置 人孔以及视镜 其它 本章要求 了解发酵设备的种类 掌握通气式机械搅拌发酵罐的结构 掌握通气式机械搅拌发酵罐的相关操作 4. 轴封 轴封的作用是防止泄漏和染菌。 常用的轴封有填料函和端面轴封两种。 轴封部位 填料函 优点：结构简单 缺点： 死角多，很难彻底灭菌，容易渗漏及染菌； 轴的磨损情况较严重； 填料压紧后摩擦功率消耗大； 寿命短，维持工时多。 端面轴封 的作用——靠弹性元件（弹簧、波纹管等）的压力使垂直于轴线的动环和静环表面紧密地相互贴合，并作相对转动而达到密封。 优点： 清洁； 密封可靠，使用时间较长，不会泄漏； 无死角，可防止杂菌污染； 寿命长，质量好的2～5年不需修理； 摩擦功率耗损小； 轴或轴套不受磨损； 对轴的震动敏感性小。 两端面接触的密封构件之一为硬质合金，如高硅铸铁、金属碳化钨等；另一种为软质耐磨材料，如不锈性石墨，用作静环。 两接触面的密封需要有一定的压力，完全由弹簧来保证这种压力——不平衡型。 若搅拌轴装于罐底，则密封要求高，应选用双端面轴封。 端面轴封 填料函 5. 仪表 工艺参数 温度 压力 空气流量 液位 pH值 溶解氧 参数包括： 物理参数： 化学参数： 间接参数： 轴的功率、发酵液的粘度、温度、压力 pH值、糖含量、无机离子浓度、排气中的CO2 呼吸熵、细胞干重、产物的含量 （1）压力表 弯管液封，上面的杂菌不会掉入下面管道中。 会有培养基冲入，污染压力表； 起不到缓冲作用； 灭菌冷却后有冷凝水（含菌）掉入罐内，污染菌种 直管缺点 阀门三通，使弯管灭菌彻底 仪表精度 γ％ = ％ │A－A0│ Q A— 测量值 A0— 真实值 Q— 仪表测量范围（量程） 精度相同，量程越窄越精确； 读数在0～2/3量程； 如种子罐、发酵罐工作压力1 kg/cm2，蒸气压力2～3kg/cm2，配量程为6～7kg/cm2的压力表 （2）温度计 （3）流量计 常用的水银、酒精温度计 0～100℃，酒精温度计 100℃，水银温度计 转子流量计 二、发酵罐的灭菌 （在夹套中）关好空气阀，蒸气上进下出，冲蒸气，压力大于2 kg/cm2（120℃），最好是4～5 kg/cm2（160℃）。 当罐内温度80℃，进蒸气口（蒸气阀）关掉，出蒸气口（排气阀）关小。打开空气阀，蒸气直接进罐，121℃，20～30min。 升温过程中，从80℃～100℃上升很快，大于100℃后温度上升很慢，到118℃时就开始减小蒸汽通入量并开始计时，计时25min时立即关掉蒸气阀。 关掉蒸气阀后通入无菌空气，使罐内一直保持正压（高于大气压，空气不会倒灌入罐内）。 （在夹套中）立即加自来水冷却，从下向上，使温度尽快降到55℃左右，到37～38℃时关掉水，也有缓冲性。 因为有缓冲性，蒸气会冲到121℃。 在80℃以上冲入蒸气不容易产生冷凝水，罐内体积不会增加很大，培养基不会被稀释很大。 过程 升温降温时注意缓冲性 灭菌时蒸气先从夹套预热，如直接进罐，蒸气冷凝，产生冷凝水、无法接种、容易污染 冬天温度低、散热快，低于30℃需加温。加温时蒸气由下进入、从上而出。如从25℃→30℃，加热到28℃时即可关蒸气阀 微生物代谢发酵时产生大量热，使温度大于30℃，需考虑适当降温。冷却时冷却水由下进入、从上而出，注意缓冲性，不要降至30℃才关 小型罐 50L～7吨用夹套系统冷却；大型罐7吨以上，用冷却管（盘肠、列管系统） 二、发酵罐的灭菌 注意点 * * * * 生物工艺实验室包括： 无菌室 准备室 湿地板区 通用实验区 分析区 接种操作 菌种培养等 发酵 发酵液的分析 配制培养基等 无菌室 拉门 更衣室 缓冲间 消毒间 拱形顶，水滴会滑下来，不会直接滴下来 坡形地面，便于泻水 高度：一人加一手，便于消毒清扫； 墙面涂上漆，最好不锈钢材料，光滑； 顶上安紫外灯，高出操作台30cm 工作台 准备室 天平、灭菌锅、培养箱、pH计 摇床 灭菌消毒：KMnO4和甲醛熏蒸，比例根据污染程度而定； 注意安全，关好窗防止MnO2跑掉。 往复式——供氧比较好，但培养液容易溅起、易污染 旋转式——溶解氧较少，培养液不容易溅起 通用试验区 培养基的配制、细胞干重以及普通的测定（粘度等） 湿地板区 发酵罐、蒸馏装置、灭菌设施