结球甘蓝叶片卷曲相关7个同源异型盒基因的克隆与表达分析.pdf

园 艺 学 报 2014 ，41 （5 ）：859 –868 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 结球甘蓝叶片卷曲相关 7 个同源异型盒基因的 克隆与表达分析 * ** ** 任雪松，张林成 ，蒲全明，高启国 ，王小佳 ，宋 明 （西南大学园艺园林学院，教育部南方山地园艺学重点实验室，重庆市蔬菜重点实验室，重庆400715 ） 摘 要：以结球甘蓝（Brassica oleracea L. ）‘519 ’品系为试材，通过结球期茎尖和叶片以及莲座期 茎尖和叶片的转录组对比分析，筛选出 4 个显著差异表达 HB 类基因，分别为 BoHAT2 、BoHB12 、BoHB7 和 BoHB27 。进一步对上述4 个基因以及调控拟南芥（Arabidopsis thaliana ）叶片卷曲但在结球甘蓝转录 组中未检测到表达差异的基因 BoPHB 、BoPHV 和 BoREV 进行了同源克隆。序列分析表明上述 7 个基因 都含有同源异型域（homeodomain ，HD ），具有同源异型盒（homeobox ，HB ）蛋白家族的典型结构特征。 BlastP （蛋白序列与蛋白库做比对）表明它们与拟南芥的同源蛋白相似性高，来自结球甘蓝的BoHAT2 、 BoHB12 、BoHB7 、BoHB27 、BoPHB 、BoPHV 、BoREV 与拟南芥中的 HAT2 、ATHB12 、ATHB 7 、ATHB27 、 PHB 、PHV 、REV 蛋白同源，同源性分别为 86%、80%、79%、60%、94%、95%和 96% 。BlastP 比对和 进化树分析结果表明，BoHAT2 属于 HD-Zip Ⅱ类，BoHB12 和 BoHB7 属于 HD-Zip Ⅰ类，BoHB27 属于 ZF-HD ，BoPHB 、BoPHV 和 BoREV 属于 HD-Zip Ⅲ类。BoHAT2 、BoHB12 、BoHB7 、BoHB27 、BoPHB 、 BoPHV 、BoREV 在结球甘蓝莲座期到结球期的茎尖和叶片中均有表达，BoHB12 和 BoHB7 在结球期叶片 中表达量显著增高，分别是莲座期叶片的 38.1 倍和 6.2 倍，其余基因表达量差异不明显，表明 BoHB12 和 BoHB7 可能是结球甘蓝球叶自然卷曲过程中的主效调控基因。 关键词：结球甘蓝；同源异型盒蛋白；基因克隆；表达分析 中图分类号：S 635.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2014 ）05-0859-10 Molecular Clonging and Expression Analysis of Seven Homebox Genes from Brassica oleracea * ** ** REN Xue-song ，ZHANG Lin-cheng ，PU Quan-ming ，GAO Qi-guo ，WANG Xiao-jia ，and Song Ming （College of Horticulture and Landscape Architecture，Southwest University ；Key Laboratory of Horticulture Science for Southern Mountainous Regions ，Ministry of Education ；Chongqing Key Laboratory of Oleric