细胞组织基因组DNA提取试剂(溶液型)试剂盒组成储存稳定性.PDF

DNA ( ) 细胞组织基因组DDNNAA提取试剂((溶液型)) 一、试剂盒组成、储存、稳定性 50次 100次 200次 试剂盒组成 保存 （DP1901） （DP1902） （DP1903） 裂解液SL 室温 10 ml 20 ml 40 ml 结合液CB 室温 10 ml 20 ml 40 ml 15 ml 15mlX2 15mlX4 漂洗液PW 室温 第一次使用前按说明加指定量乙醇 洗脱缓冲液EB 室温 15 ml 30 ml 60 ml 蛋白酶K（20mg/ml） 20mg 20mgX2 20mg X4 -20℃ （仅II型提供） 冻干粉 冻干粉 冻干粉 吸附柱 室温 50个 100个 200个 收集管（2ml） 室温 50个 100个 200个 12 本试剂盒在室温储存1122个月不影响使用效果。 注意事项 1． 第一次使用前请先在15ml漂洗液PW中加入60ml无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标 记已加入乙醇，以免多次加入! 2． 结合液SB低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却 到室温即可使用。 3． 为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入1毫升灭菌水 溶解，因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量(20微升)分装冻存，-20℃ 保存。 4． 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。 二、原理简介 本试剂盒用于快速的从动植物细胞/组织中提取基因组DNA。样品研磨或者匀浆后加入细胞核裂解液， 首先在强去污剂或者和蛋白酶K协同作用下裂解细胞释放出基因组DNA，接着加入RNase A去除RNA，然后 蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白，最后纯净的基因组DNA通过异丙醇沉淀并重溶解于DNA溶解液。 三、试剂盒特点 不需要使用有毒的苯酚、氯仿等试剂。 快速，简捷，组织样品操作整个过程可在1个小时内完成。 结果稳定，产量高（比离心柱型的产量高一倍以上），OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达 50Kb-150kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应以及文库构建。 四、注意事项（实验前必须首先阅读这部分！） 1． 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13，000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2． 用户需自备异丙醇、70％乙醇、PBS(用于细胞)、液氮研钵/或匀浆器(用于组织）、0.5mol EDTA 和蛋白酶K(用于鼠尾)、水浴箱。 3． 开始实验前将需要的水浴先预热好备用。 4． 本试剂盒为溶液型，可以很容易的按照比例扩大或者缩小每次处理的组织细胞量，请联系我们 索取其它处理量的操作手册。 五、操作步骤 1．组织培养细胞 a．收集细胞到一个1.5ml离心管，对于贴壁细胞，应该先用胰蛋白酶消化后吹打下来收集。 b．