结核分枝杆菌异烟肼耐药基因突变的研究.pdf

湖南医科大学学报 ( ) 　2001 ,26 3 BULL HUNAN MED UNIV 195 ① 结核分枝杆菌异烟肼耐药基因突变的研究 姚孟晖 , 罗映辉 ( 中南大学湘雅医学院微生物学教研室 , 长沙 410078) ( ) [摘要] 　目的: 了解我国结核分枝杆菌耐异烟肼 INH 分离株 kat G 基因突变情况 ,探讨快速检测结核分枝杆菌耐 ( ) ( ) 药基因型的分子药敏检测方法 。方法 :用 PCR 单链构象多态性 PCRSSCP 和 PCR 直接测序法 PCRDS 检测 30 株结 核分枝杆菌临床分离株的kat G 基因。结果 : 以结核分枝杆菌 H R 标准株对照观察所有 INH 敏感株的 PCRSSCP 和 37 V PCRDS 图谱 ,均未发现异常 ; 而在 12 株 INH 耐药株中 ,有 4 株无 PCRSSCP 和 PCRDS 图谱异常 , 占 INH 耐药株的 334 % ;有 5 株在 94 位发生核苷酸错义突变 , 占INH 耐药株 417 % ,有 3 株在 96 位发生核苷酸同义突变 , 占 INH 耐药 株的25 % 。结论 :多数结核分枝杆菌耐 INH 是由于其 kat G 基因突变所致 ,可先用 PCRSSCP 筛选突变株 ,再用 PCRDS 方法测定其突变位点 ,达到快速检测结核分枝杆菌 INH 耐药基因型的目的。 [ 关键词] 　结核杆菌 ; 　分枝杆菌属 ; 　药物耐受性 ; 　多聚酶链反应 ; 　顺序分析 ,脱氧核糖核酸 ; 　异胭肼 ( ) [ 中图分类号] 　Q939131 　R9783 　　　[文献标识码] 　A 　　　[文章编号] 2001 Studies on mutation of isoniazid resistant genes in M. tuberculosis YAO Menghui , LOU Yinhui ( Dep artment of Microbiology , Xiangy a School of Medicine , Central South University , Changsha 410078 , China) Abstract : Objective 　To understand mutation of isoniazidresistant genes in M. tuberculosis clinical iso lates , and to develop the method for rapid detection of drug resistance . Method 　Analyzing the kat G genes in 30 M. tuberculosis clinical isolates with PCRSSCP ( single stranded conf