鲫皮肤蛋白质组双向电泳与部分蛋白点的质谱鉴定.pdfVIP

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2019-02-04 发布于天津
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鲫皮肤蛋白质组双向电泳与部分蛋白点的质谱鉴定.pdf

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鲫皮肤蛋白质组双向电泳与部分蛋白点的质谱鉴定

第 40 卷第 4 期水产学报 Vol. 40, No. 4 2016 年 4 月 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA Apr., 2016 文章编号: 1000–0615(2016)04–0528–09 DOI: 10.11964/jfc.20150709994 鲫皮肤蛋白质组双向电泳与部分蛋白点的质谱鉴定 1 2 1, 3* 1 1 胡秀彩，沈晓静，吕爱军，孙敬锋， YEONG Yiksung ， 3 3 3 宋亚娇，李莉，孔祥会 (1. 天津农学院水产学院，天津市水产生态及养殖重点实验室，天津 300384 ； 2. 江苏师范大学生命科学学院，江苏徐州 221116 ； 3. 河南师范大学水产学院，河南新乡 453007) 摘要：为了建立鱼类皮肤蛋白质组双向电泳图谱及质谱鉴定，以鲫为实验动物，采用蛋白双向电泳(2-DE)结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)技术，进行鲫皮肤的蛋白质组学研究。结果表明，当上样量为800 µg ，采用18 cm、pH 3~10 IPG胶条，等电聚焦80 000 Vh ，2-DE 图谱检测为214个皮肤蛋白点，匹配率达88% ；对其中31个蛋白点进行MS/MS鉴定为22种蛋白，包括肌球蛋白、肌动蛋白、角蛋白、锌指蛋白585B、效应蛋白Rab15 、卷曲螺旋结构域蛋白168、NCK1 相关蛋白，肌酸激酶、烯醇化酶、丙酮酸脱氢酶、腺苷酸激酶同工酶等；进行蛋白功能聚类(GO)分析发现12种生物学过程，主要参与代谢、细胞、有机体、免疫应答、生物调节和信号等过程。本研究首次初步揭示鲫皮肤蛋白质组及分子机制，以期为鱼类病害的预防和治疗提供科学参考。关键词: 鲫；皮肤；蛋白质组；双向电泳；质谱中图分类号: Q 786 ；S 917.4 文献标志码: A 鱼类皮肤作为黏膜免疫系统的重要组成部 coioides)等鱼类的皮肤培养液中检测到特异性抗 [8-10] 分，也是阻止病原微生物进入体内的第一道防体，证实鱼类皮肤分泌抗体主要参与适应免 [1] 线。鱼类皮肤黏膜免疫系统不仅可防御宿主对疫过程并防御病原的感染。此外，鱼类皮肤组病原的入侵，而且对水产养殖疫苗应用也十分织分泌的黏液与其他活性物质可以非特异抵御 [2-3]