长期施肥对黑土大豆根瘤菌群体结构和多样性的影响.pdf

生物多样性 2015, 23 (1): 68–78 doi: 10.17520/biods.2014148 Biodiversity Science http: // 长期施肥对黑土大豆根瘤菌群体结构 和多样性的影响 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 3 1,2* 关大伟 李 力 姜 昕 马鸣超 曹凤明 周宝库 李 俊 1 (中国农业科学院农业资源与农业区划研究所, 北京 100081) 2 (农业部微生物产品质量安全风险评估实验室, 北京 100081) 3 (黑龙江省农业科学院土壤肥料与环境资源研究所, 哈尔滨 150006) 摘要: 为揭示长期施肥对黑土大豆根瘤菌群体结构和多样性的影响, 采用BOX-PCR 、IGS-PCR-RFLP和16S rDNA 基因序列分析法, 对分离自黑龙江省7种长期不同施肥处理的254株大豆根瘤菌进行了遗传多样性和系统发育分 析, 结合土壤理化性质分析了大豆根瘤菌群体结构和多样性与土壤因子间的关系。7种处理分别为不施肥(CK)、有 机肥(OM) 、单施氮肥(N ) 、单施2倍氮肥(N ) 、氮肥+有机肥(N +OM) 、氮肥磷肥混施(N P )和2倍氮肥磷肥混施 1 2 1 1 1 (N P ) 。系统发育分析结果表明, 所有供试菌株均为慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium), 其中大部分菌株与日本慢生大 2 2 豆根瘤菌 (Bradyrhizobium japonicum) 相似性最高 , 少部分菌株与辽宁慢生大豆根瘤菌 (Bradyrhizobium liaoningense)相似性最高。BOX-PCR聚类分析结果表明, 供试菌株在70%相似性水平上分为15个群, 在与施肥处理 相关性分析中分为3个群体, 分别对应于不施化肥处理(CK和OM)、化学氮肥处理(N 、N 、N +OM) 、氮肥磷肥处 1 2 1 理(N P 和N P ) 。典范对应分析结果表明, 土壤pH 、速效氮和速效磷与根瘤菌群体结构相关性极显著(P ＝0.002, 1 1 2 2 0.004, 0.002) 。不同施肥措施下大豆根瘤菌的多样性有明显差异: N P 处理的丰富度指数和Shannon-Wiener指数显 2 2 著高于其他处理; OM处理的Simpson指数最高; N 和N 处理的3种多样性指数都显著低于其他处理。通径分析结果 1 2 表明, pH、速效磷对多样性指数有较高的直接正效应; 速效氮通过pH 的间接负效应影响多样性指数。本研究表明